溶酶体和泛素-蛋白酶体途径参与干扰素-α下调p11和5-羟色胺受体1b/
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- 论文作者：郭继强 ; 冯来鹏 ; 关丫丫 ; 丁华夏 ; 杨婷婷 ; 王辉
- 年：2016
- 作者机构：新乡医学院基础医学院;新乡医学院检验学院;新乡医学院第三附属医院;
- 论文关键词：干扰素-α ; p11 ; 5-HTR1b ; 5-HTR4 ; MG132 ; NH4CL
- 会议召开时间：2016-11-04
- 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
- 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
- 语种：中文
- 分类号：R392
- 学会代码：IGMD
- 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
- 会议地点：中国安徽合肥
- 主办单位：中国免疫学会
- 学会名称：中国免疫学会
- 页数：2
- 文件大小：1354k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
干扰素-α是一种经典的固有免疫细胞因子,因其具有显著的抗病毒和抗肿瘤活性,因此常用于抗病毒(乙型肝炎和丙型肝炎)和抗肿瘤(黑色素瘤和乳腺癌)的治疗。但是干扰素-α的长期使用会引起部分患者出现不同程度的精神抑郁,这大大限制了干扰素-α的使用。我们的研究发现"p11蛋白和5-羟色胺受体"系统在干扰素-α诱导抑郁中发挥重要作用。干扰素-α可以下调C57小鼠(海马和扣带回区域)和SH-sy5y细胞的p11蛋白的表达,进而降低其5-羟色胺受体(5-HTR1b和5-HTR4)的表达,并导致小鼠的抑郁症状。我们需要进一步弄清干扰素-α下调p11和5-HTR1b/4的分子机制。目的:揭示干扰素-α下调p11和5-HTR1b/4的分子机制。方法:本研究以神经元母细胞瘤细胞系(SH-sy5y)为实验对象,采用干扰素-α、MG132和NH4CL分别单独或联合刺激细胞,分别提取mRNA逆转cDNA,提取细胞总蛋白,检测p11和5-HTR1b/4的mRNA和蛋白水平。细胞转染si-RNA的方法来建立p11基因沉默模型,观察p11缺失状态下,干扰素-α对5HTR1b/4表达的影响。细胞共转染p11-Cherry和LAMP-1-GFP质粒,激光共聚焦观察p11在溶酶体的定位特征。结果:1干扰素-α可显著下调p11和5-HTR1b/4的蛋白表达,但是不影响p11和5-HTR1b/4的基因转录;2 20m M NH4CL处理6h可显著逆转干扰素-α对p11蛋白的下调作用,而MG123无此作用;3激光共聚焦检测显示p11可以与LAMP-1共定位,且干扰素处理组较对照组其共定位系数"Pearson’s Coefficient"显著升高;4 20m M NH4CL处理6h和50μM均可显著逆转干扰素-α对5-HTR1b/4蛋白的下调作用;5 p11缺失状态下,MG132处理组可显著干扰素-α对5-HTR1b和5-HTR4的下调作用,而NH4CL处理组无此现象。结论:1干扰素-α对p11的下调作用是依赖于溶酶体途径的,与泛素化无关;干扰素-α可以促进p11进入溶酶体;2干扰素-α对5-HTR1b/4的下调作用是依赖于p11的蛋白水平;3 p11的缺失可加速5-HTR1b/4通过泛素-蛋白酶体途径的降解,而非溶酶体途径。
引文