mmu-miR-222靶标基因SOCS1的鉴定
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- 论文作者：杨静 ; 邵忠伟 ; 苏梦 ; 郭小腊 ; 郑亚东
- 年：2016
- 作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;
- 论文关键词：多房棘球蚴抗原 ; SOCS1 ; mmu-miR-222
- 会议召开时间：2016-08-08
- 会议录名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会论文摘要集
- 英文会议录名称：The Abstracts of the Tenth Symposium for Yong Scientists of China Society of Parasitology
- 语种：中文
- 分类号：S855.9
- 学会代码：JISC
- 会议名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会
- 会议地点：中国四川成都
- 主办单位：中国动物学会寄生虫学专业青年委员会
- 学会名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会
- 页数：1
- 文件大小：601k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
目的为了研究多房棘球蚴病的免疫机理,用多房棘球蚴抗原处理小鼠巨噬细胞,结果发现小鼠巨噬细胞的mi R-222的表达量下降,而它的其中一个靶标分子SOCS1基因的表达量上升。推测SOCS1为mi R-222的真正靶标分子。方法通过使用PCR方法扩增含SOCS1基因3'-UTR区序列,插入到双酶切的双荧光素酶报告载体中,构建SOCS1基因3'-UTR段双荧光素酶报告载体,使用生物信息学方法预测可能与SOCS1基因3'-UTR相互作用的mi R-222,使用Lipofectamine 2000Reagent转染试剂将重组质粒或空质粒和mi R-222 inhibitor或control真核表达载体共转染HEK293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶的活性。结果获得含SOCS1基因3'-UTR(441bp)序列的双荧光素酶报告重组质粒,并用凝胶电泳、基因测序方法验证。荧光素酶报告基因检测结果显示,SOCS1-WT(野生型)+mmu-miR-222类似物共转染组与SOCS1-WT(野生型)+阴性共转染对照组相比差异极显著(P<0.01),SOCS1-WT(野生型)+mmu-mi R-222类似物共转染组与SOCS1-MT(突变型)+mmu-miR-222类似物共转染组相比差异极显著(P<0.01),而SOCS1-WT(野生型)+阴性共转染对照组与SOCS1-MT(突变型)+mmu-mi R-222类似物共转染组相比差异不显著(P>0.05),表明mmu-mi R-222可以抑制它其中的一个靶基因SOCS1的表达。结论 mmu-mi R-222可与SOCS1基因3‘端结合,对其具有抑制作用。
引文