烟草黑胫病与青枯病生防芽孢杆菌筛选
|
摘要
烟草黑胫病与青枯病是贵州省黔西南州安龙县烤烟上主要根茎病害。为筛选防治烟草黑胫病与青枯病的芽孢杆菌,从安龙县烟草黑胫病与青枯病混合发生地块采集健康烟株根际土壤,分离到根际芽孢杆菌662株。采用平板对峙法筛选同时拮抗这2种病菌的芽孢杆菌。结果表明,2株芽孢杆菌具明显拮抗烟草黑胫病菌(Phytophthora nicotianae)与青枯病菌(Ralatonia solanacearum)的能力,通过形态学、生理生化测定及分子生物学鉴定,2株芽孢杆菌均为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。本研究为贵州烟草生防制剂的研发打下基础。
Tobacco black shank and bacterial wilt are the major rhizomatic diseases of tobacco planting regions in Anlong,southwest of Guizhou province. Healthy tobacco rhizosphere soil,collected in high incidence of tobacco black shank and bacterial wilt fields in Anlong,Guizhou province,were isolated to 662 Bacillus strains. Antagonistic Bacillus against black shank and bacterial wilt were screened with a plate confrontation method,and the results show that 2 Bacillus had obvious antagonistic ability against Phytophthora nicotianae and Ralatonia solanacearum. These 2 Bacillus were identified as Bacillus amyloliquefaciens through morphological,physiological and biochemical,and molecular biology analysis. This study lays a foundation for the development of Guizhou tobacco bio-control agents.
Tobacco black shank and bacterial wilt are the major rhizomatic diseases of tobacco planting regions in Anlong,southwest of Guizhou province. Healthy tobacco rhizosphere soil,collected in high incidence of tobacco black shank and bacterial wilt fields in Anlong,Guizhou province,were isolated to 662 Bacillus strains. Antagonistic Bacillus against black shank and bacterial wilt were screened with a plate confrontation method,and the results show that 2 Bacillus had obvious antagonistic ability against Phytophthora nicotianae and Ralatonia solanacearum. These 2 Bacillus were identified as Bacillus amyloliquefaciens through morphological,physiological and biochemical,and molecular biology analysis. This study lays a foundation for the development of Guizhou tobacco bio-control agents.
引文
[1]彭丽娟，丁海霞，陆铮铮．贵州烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗药性测定[J]．贵州农业科学，2014(8):92-95.
[2]胡吉凤，谷小平，刘健锋，等．贵州省不同气候区烟草青枯病发生现状研究[J]．广东农业科学，2013(21):88-90.
[3]陈瑞泰，朱贤朝，王智发，等．全国16个主产烟省(区)烟草侵染性病害调研报告[J]．中国烟草科学，1997(4):3-9.
[4]陈继峰，赵松辉，蔡凯旋，等．河南烟草连作状况调查及连作障碍解决对策研究[J]．中国园艺文摘，2014(5):218-222.
[5]葛永怡，陈雪，李祝，等．毕节市烟草黑胫病的发生情况及其病原菌鉴定[J]．贵州农业科学，2012(12):108-110.
[6]丁海霞，龙友华，葛永怡，等．毕节地区烟草黑胫病菌对甲霜灵抗药性的初步检测[J]．贵州农业科学，2011(4):90-92.
[7]韩腾，张立猛，高加明，等．枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Tpb55灌根与烟草根围细菌多样性变化的相关性[J]．微生物学报，2016(5):835-845.
[8]张玉玲，朱艰，杨程，等．生物防治在烟草病虫害防治中的应用进展[J]．中国烟草科学，2009(4):81-85.
[9]翟秋倩，刘丽，李俊峰．芽孢杆菌防治烟草病虫害的研究进展[J]．氨基酸和生物资源，2016(3):7-11.
[10]邱德文．我国植物病害生物防治的现状及发展策略[J]．植物保护，2010(4):15-18.
[11]张震，谢和，张文杰，等．贵州西南喀斯特地区土壤芽孢杆菌资源及多样性研究[J]．山地农业生物学报，2017,36(5):36-41.
[12]陈中义，张杰，黄大昉．植物病害生防芽孢杆菌抗菌机制与遗传改良研究[J]．植物病理学报，2003(2):97-103.
[13]易有金，尹华群，罗宽，等．烟草内生短短芽孢杆菌的分离鉴定及对烟草青枯病的防效[J]．植物病理学报，2007(3):301-306.
[14]王静，孔凡玉，秦西云，等．短小芽孢杆菌Ar03对烟草黑胫病菌的拮抗活性及其田间防效[J]．中国烟草学报，2010(5):78-81.
[15]舒晓玲，吴毅歆，周惠萍，等．烟草疫霉生防细菌的筛选及鉴定[J]．中国烟草科学，2012(4):60-64.
[16]陈亮，周晓见，董昆明，等．1株烟草青枯病生防细菌的分离与鉴定[J]．江苏农业科学，2012(1):104-107.
[17]刘伟．抗烟草青枯病菌的芽孢杆菌筛选、鉴定及其抑菌活性初探[D]．杨陵:西北农林科技大学，2013.
[18]徐同伟，周建云，祖庆学，等．两株烟草黑胫病拮抗菌的筛选、鉴定和促生防病潜力评价[J]．中国烟草科学，2017(3):44-50.
[19]刘伟，刘鹏，沈小英，等．烟草青枯病拮抗芽孢杆菌的筛选、鉴定及其抑菌活性初探[J]．西北农林科技大学学报(自然科学版)，2014,42(2):123-130.
[20]王进，黄艳飞，汪汉成，等．烟草疫霉拮抗菌枯草芽孢杆菌21B菌株的分离鉴定及其生物学特性研究[J]．微生物学通报，2014(12):2481-2487.
[21]陈欣怡．苹果轮纹病生防解淀粉芽孢杆菌(Bacillus Amyloliquefaciens)PG12主要生防机制研究[D]．北京:中国农业大学，2016.
[22]陈云．枯草芽孢杆菌生物膜在青枯病生防中的功能研究及Cyclic-di-GMP信号通路初探[D]．南京:南京农业大学，2012.
[23]Lane D J. 16S/23S rRNA sequencing[C]//Stackebrandt E,Goodfellow M(eds)Nucleic acid techniques in bacterial systematics. Wiley,Chichester,1991.
[24]Saitou N,Nei M. The neighbor-joining method:A new method for reconstructing phylogenetic trees[J]. Molecular Biology and Evolution,1987,4:406-425.
[2]胡吉凤，谷小平，刘健锋，等．贵州省不同气候区烟草青枯病发生现状研究[J]．广东农业科学，2013(21):88-90.
[3]陈瑞泰，朱贤朝，王智发，等．全国16个主产烟省(区)烟草侵染性病害调研报告[J]．中国烟草科学，1997(4):3-9.
[4]陈继峰，赵松辉，蔡凯旋，等．河南烟草连作状况调查及连作障碍解决对策研究[J]．中国园艺文摘，2014(5):218-222.
[5]葛永怡，陈雪，李祝，等．毕节市烟草黑胫病的发生情况及其病原菌鉴定[J]．贵州农业科学，2012(12):108-110.
[6]丁海霞，龙友华，葛永怡，等．毕节地区烟草黑胫病菌对甲霜灵抗药性的初步检测[J]．贵州农业科学，2011(4):90-92.
[7]韩腾，张立猛，高加明，等．枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Tpb55灌根与烟草根围细菌多样性变化的相关性[J]．微生物学报，2016(5):835-845.
[8]张玉玲，朱艰，杨程，等．生物防治在烟草病虫害防治中的应用进展[J]．中国烟草科学，2009(4):81-85.
[9]翟秋倩，刘丽，李俊峰．芽孢杆菌防治烟草病虫害的研究进展[J]．氨基酸和生物资源，2016(3):7-11.
[10]邱德文．我国植物病害生物防治的现状及发展策略[J]．植物保护，2010(4):15-18.
[11]张震，谢和，张文杰，等．贵州西南喀斯特地区土壤芽孢杆菌资源及多样性研究[J]．山地农业生物学报，2017,36(5):36-41.
[12]陈中义，张杰，黄大昉．植物病害生防芽孢杆菌抗菌机制与遗传改良研究[J]．植物病理学报，2003(2):97-103.
[13]易有金，尹华群，罗宽，等．烟草内生短短芽孢杆菌的分离鉴定及对烟草青枯病的防效[J]．植物病理学报，2007(3):301-306.
[14]王静，孔凡玉，秦西云，等．短小芽孢杆菌Ar03对烟草黑胫病菌的拮抗活性及其田间防效[J]．中国烟草学报，2010(5):78-81.
[15]舒晓玲，吴毅歆，周惠萍，等．烟草疫霉生防细菌的筛选及鉴定[J]．中国烟草科学，2012(4):60-64.
[16]陈亮，周晓见，董昆明，等．1株烟草青枯病生防细菌的分离与鉴定[J]．江苏农业科学，2012(1):104-107.
[17]刘伟．抗烟草青枯病菌的芽孢杆菌筛选、鉴定及其抑菌活性初探[D]．杨陵:西北农林科技大学，2013.
[18]徐同伟，周建云，祖庆学，等．两株烟草黑胫病拮抗菌的筛选、鉴定和促生防病潜力评价[J]．中国烟草科学，2017(3):44-50.
[19]刘伟，刘鹏，沈小英，等．烟草青枯病拮抗芽孢杆菌的筛选、鉴定及其抑菌活性初探[J]．西北农林科技大学学报(自然科学版)，2014,42(2):123-130.
[20]王进，黄艳飞，汪汉成，等．烟草疫霉拮抗菌枯草芽孢杆菌21B菌株的分离鉴定及其生物学特性研究[J]．微生物学通报，2014(12):2481-2487.
[21]陈欣怡．苹果轮纹病生防解淀粉芽孢杆菌(Bacillus Amyloliquefaciens)PG12主要生防机制研究[D]．北京:中国农业大学，2016.
[22]陈云．枯草芽孢杆菌生物膜在青枯病生防中的功能研究及Cyclic-di-GMP信号通路初探[D]．南京:南京农业大学，2012.
[23]Lane D J. 16S/23S rRNA sequencing[C]//Stackebrandt E,Goodfellow M(eds)Nucleic acid techniques in bacterial systematics. Wiley,Chichester,1991.
[24]Saitou N,Nei M. The neighbor-joining method:A new method for reconstructing phylogenetic trees[J]. Molecular Biology and Evolution,1987,4:406-425.
© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号 地址：北京市海淀区学院路29号 邮编：100083 电话：办公室：(+86 10)66554848；文献借阅、咨询服务、科技查新：66554700 |