啤酒酵母对微量元素钒的富集及其部分生化特性的研究
摘要
钒是人体必需的微量元素之一,大量研究表明,钒在动物和人体中起着重要的生理作用,另外,钒与细胞凋亡、癌症和营养代谢紧密相关,并作用于免疫系统。体内钒的缺乏会导致糖、脂代谢紊乱,从而诱发糖尿病和心血管疾病,而在人体中补充微量的钒,对这些疾病有明显的治疗作用。
本实验以啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae, Meyen ex Hansen)为载体,在培养基中添加偏钒酸铵,利用啤酒酵母可以富集微量元素的特性,将无机钒富集到细胞内。
对 5 株本室保藏的啤酒酵母进行了筛选,经过抗性筛选和摇瓶发酵培养获得了一株编号为 RCEF1023 的富钒菌株,作为研究菌株。
通过对液体培养基的筛选以及葡萄糖、麦芽汁、蛋白胨、酵母浸出粉四因子的正交实验,确定了 RCEF1023 菌株的最适发酵培养基配方为:葡萄糖 1% 、酵母浸出粉0.3%、 蛋白胨 0.5% 、11BX 麦芽汁 25%。
在液体摇瓶培养条件试验中还研究了钒浓度、培养温度、pH、培养时间、接种量和装液量等因素对啤酒酵母 RCEF1023 菌株的生物量及钒含量的影响,初步优化了RCEF1023 菌株的富钒培养条件,结果表明:钒加入量为 40μg/mL,接种量为 10%,pH 为 6.0,装液量为 50mL/500mL 三角瓶,培养温度为 28℃,48h 后,富钒酵母生物量为 0.663g/100mL,钒含量达到 587.6μg/g。同时发现培养基的钒浓度,PH 和装液量显著影响富钒酵母的钒含量和生物量。
为了测定富钒酵母中有机钒的含量,在实验中采用了浸出法使钒酵母中的无机钒和有机钒得以分离,从而测得了钒酵母中有机钒含量。有机钒含量可达到 474.9μg/g。
对富钒酵母自溶条件进行了研究,结果表明:pH 7.0, 55℃, 2 4h的条件下,自溶物中蛋白质含量最高,为最佳自溶条件,对影响酸—热破碎法的条件进行了研究,结果表明 :3mol/LHCl,浸泡 6min,热处理 3min,迅速冷却的条件下,蛋白质含量最高,为最佳破碎条件。将两种方法进行比较,发现破碎后内容物溢出量及钒含量非常接近,差别不明显。
此外,通过对普通酵母和钒酵母进行 200nm 到 600nm 全波长紫外光谱扫描分析,发现钒酵母在 311nm 处有一特征吸收峰;通过红外光谱分析,发现钒酵母在 1794cm-1处有特征吸收峰。
粗蛋白样品经 Sephadex G-100 色谱柱分离,得到二个主要组分 FractionⅠ和FractionⅡ,得率分别为 8.2%、16.0%。其钒含量分别为 FractionⅠ1.66μg/mg、FractionⅡ8.08μg/mg。
The vanadium is one of the essential trace elements of human body. A large amount ofresearch shows that vanadium plays an important physiological function in animal and thehuman bodies. In addition, vanadium related to withering and death of cell, cancer as wellas nutrition metabolism by acting on the immune system. The shortage of the internalvanadium will cause the metabolism disorder of sugar and fat, and consequently result indiabetes and cardiovascular diseases, while the supply of micro-vanadium in the humanbody will obviously help to treat these diseases.
Brewer’s yeast is able to assimilate a great number of minerals and trace element intoa nutritious product. In this work, brewer’s yeast was used to enrich vanadium by addingNH4VO3into culture media, making inorganic vanadium to be accumulated into cells.
From 5 strains of brewer’s yeast of stock culture in this laboratory, Saccharo mycesceveisiae RCEF1023 which is suitable for V-rich yeasts fermentation, was selected byresistant screening and flask fermentation.
Through liquid culture screening and the orthogonal design experiment ,the recipe offermentive medium was prescribed: 1% glucose, 0. 3% yeast extract, 0.5% peptone , 25%11BX wort.
The concentration of vanadium, culture temperature , pH , culture time , inoculmsvolume, volume of medium etc factor were also studied and the primary optimization ofcultivation conditions was selected through fermentation test. The result showed that theoptimal condtions for the enrichment of vanadium into yeast was obtained after 48h at28℃, when inoculms volume was 10% (V/V) with 50mL of culture in 500mL shake flaskswhich was grown in culture fluid containing 40μg/mL V+5. The initial pH was adjusted 6.0.Under the optimal cultivation conditions, the biomass (dry weight) of 100mL fermentationreached 0.663g and enrichment quantity of vanadium was about 587.6μg/g. It was evidentthat the concentration of vanadium, pH and volume of medium greatly affected thebiomass and vanadium content of the brewer’s yeast.
In order to test the content of the organic vanadium in vanadium-rich brewer’s yeast,adopting lixiviation process to separate inorganic vanadium and organic vanadium fromthe vanadium yeast , so the content of organic vanadium in the vanadium yeast could beaccurately determined. The content of organic vanadium in the test was 474.9μg/g.
Study on the autolysis condition of vanadium-rich brewer’s yeast turned out that theoptimal conditions for antolysis were pH 7.0, 55℃and 24h for acid-heat shiver 3mol/LHCl, 6min soaking, and 3min.heating No significant difference was observed betweenthe two methods in their shiver effect. In addition, with ultraviolet spectrometry scanning within 200~600nm measurementof the ordinary yeast and vanadium-rich yeast, the vanadium-rich yeast has a characteristicabsorption in 311nm. With the determination of infrared spectrometry, the vanadium yeasthas a characteristic absorption in 1794cm-1. The raw protein was further separated into two fractions by Sephadex G-100 gelchromatography. The yield rates of FractionⅠand FractionⅡwere 8.2%,16.0%.Thevanadium content of FractionⅠand FractionⅡwas 1.66μg/mg and 8.08μg/mg. Analyzing of 16 kinds of amino acid, it turned out that the content of Met and Phe invanadium-rich yeast was higher than that in normal yeast. This Experiment has also compared the absorption and utilization betweeninorganic vanadium and vanadium yeast by using moina macrocpa. Taking moinamacrocpa as the animal’s model, studying the influence of vanadium yeast and inorganicvanadium from the pharmacodynamics aspect . The result of the toxic test shows thatvanadium-rich brewer’s yeast can effectively reduce the toxicity of the vanadium.
本实验以啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae, Meyen ex Hansen)为载体,在培养基中添加偏钒酸铵,利用啤酒酵母可以富集微量元素的特性,将无机钒富集到细胞内。
对 5 株本室保藏的啤酒酵母进行了筛选,经过抗性筛选和摇瓶发酵培养获得了一株编号为 RCEF1023 的富钒菌株,作为研究菌株。
通过对液体培养基的筛选以及葡萄糖、麦芽汁、蛋白胨、酵母浸出粉四因子的正交实验,确定了 RCEF1023 菌株的最适发酵培养基配方为:葡萄糖 1% 、酵母浸出粉0.3%、 蛋白胨 0.5% 、11BX 麦芽汁 25%。
在液体摇瓶培养条件试验中还研究了钒浓度、培养温度、pH、培养时间、接种量和装液量等因素对啤酒酵母 RCEF1023 菌株的生物量及钒含量的影响,初步优化了RCEF1023 菌株的富钒培养条件,结果表明:钒加入量为 40μg/mL,接种量为 10%,pH 为 6.0,装液量为 50mL/500mL 三角瓶,培养温度为 28℃,48h 后,富钒酵母生物量为 0.663g/100mL,钒含量达到 587.6μg/g。同时发现培养基的钒浓度,PH 和装液量显著影响富钒酵母的钒含量和生物量。
为了测定富钒酵母中有机钒的含量,在实验中采用了浸出法使钒酵母中的无机钒和有机钒得以分离,从而测得了钒酵母中有机钒含量。有机钒含量可达到 474.9μg/g。
对富钒酵母自溶条件进行了研究,结果表明:pH 7.0, 55℃, 2 4h的条件下,自溶物中蛋白质含量最高,为最佳自溶条件,对影响酸—热破碎法的条件进行了研究,结果表明 :3mol/LHCl,浸泡 6min,热处理 3min,迅速冷却的条件下,蛋白质含量最高,为最佳破碎条件。将两种方法进行比较,发现破碎后内容物溢出量及钒含量非常接近,差别不明显。
此外,通过对普通酵母和钒酵母进行 200nm 到 600nm 全波长紫外光谱扫描分析,发现钒酵母在 311nm 处有一特征吸收峰;通过红外光谱分析,发现钒酵母在 1794cm-1处有特征吸收峰。
粗蛋白样品经 Sephadex G-100 色谱柱分离,得到二个主要组分 FractionⅠ和FractionⅡ,得率分别为 8.2%、16.0%。其钒含量分别为 FractionⅠ1.66μg/mg、FractionⅡ8.08μg/mg。
The vanadium is one of the essential trace elements of human body. A large amount ofresearch shows that vanadium plays an important physiological function in animal and thehuman bodies. In addition, vanadium related to withering and death of cell, cancer as wellas nutrition metabolism by acting on the immune system. The shortage of the internalvanadium will cause the metabolism disorder of sugar and fat, and consequently result indiabetes and cardiovascular diseases, while the supply of micro-vanadium in the humanbody will obviously help to treat these diseases.
Brewer’s yeast is able to assimilate a great number of minerals and trace element intoa nutritious product. In this work, brewer’s yeast was used to enrich vanadium by addingNH4VO3into culture media, making inorganic vanadium to be accumulated into cells.
From 5 strains of brewer’s yeast of stock culture in this laboratory, Saccharo mycesceveisiae RCEF1023 which is suitable for V-rich yeasts fermentation, was selected byresistant screening and flask fermentation.
Through liquid culture screening and the orthogonal design experiment ,the recipe offermentive medium was prescribed: 1% glucose, 0. 3% yeast extract, 0.5% peptone , 25%11BX wort.
The concentration of vanadium, culture temperature , pH , culture time , inoculmsvolume, volume of medium etc factor were also studied and the primary optimization ofcultivation conditions was selected through fermentation test. The result showed that theoptimal condtions for the enrichment of vanadium into yeast was obtained after 48h at28℃, when inoculms volume was 10% (V/V) with 50mL of culture in 500mL shake flaskswhich was grown in culture fluid containing 40μg/mL V+5. The initial pH was adjusted 6.0.Under the optimal cultivation conditions, the biomass (dry weight) of 100mL fermentationreached 0.663g and enrichment quantity of vanadium was about 587.6μg/g. It was evidentthat the concentration of vanadium, pH and volume of medium greatly affected thebiomass and vanadium content of the brewer’s yeast.
In order to test the content of the organic vanadium in vanadium-rich brewer’s yeast,adopting lixiviation process to separate inorganic vanadium and organic vanadium fromthe vanadium yeast , so the content of organic vanadium in the vanadium yeast could beaccurately determined. The content of organic vanadium in the test was 474.9μg/g.
Study on the autolysis condition of vanadium-rich brewer’s yeast turned out that theoptimal conditions for antolysis were pH 7.0, 55℃and 24h for acid-heat shiver 3mol/LHCl, 6min soaking, and 3min.heating No significant difference was observed betweenthe two methods in their shiver effect. In addition, with ultraviolet spectrometry scanning within 200~600nm measurementof the ordinary yeast and vanadium-rich yeast, the vanadium-rich yeast has a characteristicabsorption in 311nm. With the determination of infrared spectrometry, the vanadium yeasthas a characteristic absorption in 1794cm-1. The raw protein was further separated into two fractions by Sephadex G-100 gelchromatography. The yield rates of FractionⅠand FractionⅡwere 8.2%,16.0%.Thevanadium content of FractionⅠand FractionⅡwas 1.66μg/mg and 8.08μg/mg. Analyzing of 16 kinds of amino acid, it turned out that the content of Met and Phe invanadium-rich yeast was higher than that in normal yeast. This Experiment has also compared the absorption and utilization betweeninorganic vanadium and vanadium yeast by using moina macrocpa. Taking moinamacrocpa as the animal’s model, studying the influence of vanadium yeast and inorganicvanadium from the pharmacodynamics aspect . The result of the toxic test shows thatvanadium-rich brewer’s yeast can effectively reduce the toxicity of the vanadium.
引文
[1] 王夔主编.生命科学中的微量元素.北京:中国计量出版社,1996:145～171
[2] 林杰.钒及其化合物与中毒防治[M].北京:中国标准出版社.2000.1-23,38,81～90,153～ 154
[3] 杨晓达,王夔.钒化合物生物效应的化学基础和药用前景——金属药物研究的化学问题 [J] .化学进展,2002,14(4):279～286
[4] 王云,魏复盛.土壤环境元素化学[M].北京:中国环境出版社,1995.231
[5] 迟锡增.微量元素与人体健康[M].北京:化学工业出版社,1997.101
[6] 李绍章.钒元素(V)营养研究新说.湖北畜牧兽医,1997,(2):46～47
[7] 屈健.动物必需的微量元素——钒.中国饲料,1999,(15):21～22
[8] 杨鹰,袁莉,高铭宇等.微量元素钒在动物体内的研究进展.中国兽医杂志,1999,25(8): 32～34
[9] Sabbioni E, Marafante E. Relations between iron and vanadium metabolism. The exchange of vanadium between trandferin and ferritin[J]. Toxicol Environ Health,1981,8:419～429
[10] Degani H, Gohin M, Karlish S J D, et al. Electron paramagnetic studies and insulin like effects of vanadium in raqt adipocytes [J].Biochemistry,1981,20:5795～5799
[11] Hanesn T V, Aaseth J, Alexander J. The effects of chelating agents on vanadium in the rat body and uptake by human erythrocytes[J].Arch Toxicol,1982,50;195～202
[12] Edel J, Sabbioni E. Retention of intratrachealy instilled and ingested tetravalent and pentavalent vanadium in rat[J].Trace Elem Electrolytes Health Dis,1988,21:23～30
[13] French R J, Jones P J H. Role of vanadium in nutrition: metabolism, essentiality and dietary considerations [J1. Life Sci. 1993,52: 339～346.
[14] Tsiani E, Fantus I G. Vanadium compounds. Biological actions and potential as pharmacological agents[ J ] . Trends Endocrinol Metab, 1997, 851～58.
[15] Heyligex C E, Tahiliani A G, McNeill J H. Science ,1985 ,227:1474～1477
[16] McNeill J H, Yuen V G, Hoveyda H R et al. Med .Chem., 1992,35:1489～1491
[17] Chakraborty A, Selbaraj S, Sudarshan M, et al. Modulatory role of vanadium on trace element profile in diethylnitrosamine-induced rat hepatocarcinogenesis[J]. Nuclear Instruments and Methods in Physics Research B, 2000, 170: 156～162.。
[18] Swarup G, Speeg Jr K V, Cohen S, et al. Phosphotyrosyl-protein phosphatase of TCRC-2 cells[J1.Biol. Chem. 1982, 257:7298.
[19] Dubyak G R, Kleinzeller A. The insulin-mimetic effects of vanadate in isolated rat adipocytes Dissociation from effects of vanadate as a Na-KATPase inhibitor[J]. Biol Chem,1980, 255(11): 5306～5312.
[20] 靳卫民,包承玉,邵春荣.铬矾两元素对肉鸡增重的影响[J].江苏农业科学,1996,(5):59～ 61..
[21] Cantley L C,Cantley J L,Jowephson L.A Characterization of Vanadate interactions with the (NaSK)-ATPase.J Bilo Chem,1978,253:7361～7368
[22] 黄汉生.引人注目的钒化学.国际化工信息.2002.6;10～11
[23] 盛希群,徐辉碧.非肽类胰岛素类似物的研究[J].生命的化学 2003:87～88
[24] 梅光泉,应惠芳.钒及其化合物的化学性质和生物学行为[J].微量元素与健康研究 2004.4: 57～59
[25] 颜晓平,徐建雄.钒的生物学研究作用进展[J].上海交通大学学报(农业科学版)2003.9: 253～264
[26] 杨昌英,邹雪,赵儒铭.微量元素钒铬生理生化功能对比[J].微量元素与健康研究 1 998: 76～77
[27] 赵进沛, 刘卫,陈连庆.微量元素在保健食品研制开发中的应用[J].广东微量元素科学 2000:11～14
[28] 李淑敏.酵母作为微量元素的研究及应用前景[J].微生物学通报 1999:220～222
[29] 王丽娟.酵母及其培养物在动物生产中的应用.饲料工业,1999,20(9):37～39
[30] 王进波.虾青素的开发与应用汇[J].饲料研究,2000,8:15～17.
[31] 唐传核,葛文光从活性干酵母中提取海藻搪的工艺〔J〕.无锡轻工大学学报,2000,17(3): 36～41.
[32] 朱莲珍,人和动物的微量元素营养.青岛出版社 , 1994:2 2 7～2 45
[33] 陈文根,柳启沛 ,吴鸿珍.强化蛋黄粉营养价值评价 [J].食品科学 ,1 992 ,(8)∶ 47.
[34] 李俐.应用碘强化酱油改善居民缺碘状态的可行性研究 [J].中国地方病防治杂志,1995, 10 (1 )∶41
[35] 钟炳南,邱展鸿.平衡健身盐的开发及其疗效 [J].广东微量元素科学,1995,2∶ 53
[36] 王康喜,李涛.铁强化糖果服用试验效果观察 [J]广东微量元素科学,1 997,4(1 0 )∶ 45
[37] 陈子林 .产妇功能食品的研制及其保健观察 [J].食品科学,1 994,(7)∶ 57
[38] 龙正海,硒、锗的研究开发及其在医药保健品中的地位.广东微量元素科学,1 997,4(1 )∶ 1
[39] 张亚平,陈惠琴,邱卿如.加碘食盐现场检测方法探讨.中华预防医学杂志,1 993 ,2 7(2 )∶ 110
[40] 刘晓玫.儿童补锌食品的研制 [J].食品科学,1 992 ,(4)∶ 43
[41] 潘巧仪.富微营养排米粉临床及动物实验 [J].广州医药,1 992,2 3 (5)∶ 10
[42] 田晓华.富铬酵母降低高血脂作用的研究 [J].营养学报,1 994,1 6(2 )∶ 126
[43] 唐博恒.高锗酵母的研究 [J].解放军预防医学杂志,1 994,12(3)∶ 179
[44] 黄连珍.锌酵母的代谢动力学研究 [J].卫生研究,1 994,23(3)∶ 161
[45] 柳启沛.高铁食用酵母铁资源生物利用率评价 2 .婴幼儿喂养试验 [J].营养学报 ,1990 ,12 (2 )∶172
[46] 陈季强.硒酵母对小鼠免疫功能和应激能力的影响 [J].微量元素与健康研究,1997,14(1 )∶15
[47] 张学忍,刘维强,白春祥.用酵母菌富集微量元素方法探讨 [J].微量元素与健康研,1995, 12(4)∶60
[48] 李学锋,吴法先.富硒食用菌的研究 [J].微量元素与健康研究,1 992 ,(增刊 )∶ 83
[49] 范青生.培养的富锌金针菇对小鼠学习能力和免疫功能的影响[J].营养学报,1995,17(1 )∶ 89
[50] 王淑珍.锗的粮食生物转化 [J].食品科学,1 994,(5):60 .
[51] 张之申,刘森林,刘小平.硒麦芽中淀粉酶活性初探 [J].微量元素与健康研究,1997,14(1):38
[52] 王美岭.高锌蔬菜的研究 [J],卫生研究.1991,20(1)∶29.
[53] 陈定权.微量元素肥科在农业上开发应用概况 [J].广东微量元素科学,1995,2(10)∶ 44.
[54] 王敏,姚维传.大豆施硒试验研究 [J].广东微量元素科学,1995,2(5)∶12.
[55] 耿德铨,陈绍萱,滕忠爱.多元素营养鸡蛋的研制及临床应用研究[J].广东微量元素科学 , 1994,1(5)∶ 15.
[56] 吕维影.开发单体微量元素鸡蛋的探讨 [J].食品科学,1 994,(11)∶ 61.
[57] 刘金煌.高锌蛋治疗小儿锌、铁缺乏症疗效观察 [J].微量元素与健康研究 ,1997,14(2)∶ 61 .
[58] 王广仪 ,孟献梅.蜂体生物转化法制取富硒蜜中微量元素的测定与评价 [J].江西医药 ,1994,2 9(增刊):131.
[59] 王道顺.生产高硒鸡蛋和肉的方法研究 [J].中国地方病学杂志 ,1 988,7(4)∶ 234
[60] 庞文贞,李锦等.富铬酵母的-般药理学研究[J].承德医学院学报 1996:7～10
[61] 张景媛,孟庆恒等.酵母对锗的富集作用[J].天津师大学报(自然科学版)1994:55～59
[62] 肖浩平,朱勇,张晓鸣.富铬酵母培养条件的优化[J].饲料工业 2004:35～37
[63] 郭雪娜,傅秀辉等.富锌酵母的选育及培养条件研究[J].微生物学报 2004:240～242
[64] 王晓兰,顾天成.富铬啤酒酵母发酵条件的优化[J].北京轻工业学院学报 1998:34～39
[65] 王伟利,钱爱东,林艳春等.酵母富集微量元素铁的研究[J].中国微生态学杂志 2002.4: 83～84
[66] 李明春,张丽,刑来君等.富硒酵母的筛选[J].天津轻工业学院学报 2000:25～28
[67] 郝素娥,陈庆峰,刘旭等.制备有机铬添加剂—铬酵母的研究[J].粮食与饲料工业 1999: 32～33
[68] 王凤玲,邵晓芬,王银华.富锗酵母研究[J].食品科学 2002:80-84
[69] 王盛良,黄杰,黄薇等.富铬酵母的研制[J].食品科学 2001:32-35
[70] 朱靖环,沈秋泉等.啤酒酵母富铬条件的初步研究[J].食品研究与开发 2004:49～52
[71] 徐尔尼,刘文群等.食用酵母菌对 Fe,Zn,Se 生物富集作用的研究[J].中国畜产与食品 1999: 200～202
[72] 刘静,杜连祥.—株富铬酵母的研究[J].药物生物技术 2000:173～175
[73] 王岁楼,胡巅,李玉香.活性干酵母对无机硒生物转化作用的研究[J].郑州工程学院学报 2001:55～58
[74] 朵云琨,锗和锗──硒酵母的培养及其抗氧化作用初探[J].云锡科技 1993:49～51
[75] 李云芝,康红雨等.啤酒酵母富铁、富锌的生物化特性研究[J].生物技术 1997:43
[76] 陆建安,李剑芳,袁信华.饲用硒酵母制备工艺条件的优化[J].饲料工业 2002:48
[77] 薛冬桦,陆军,金花.高铁营养酵母菌种筛选[J].吉林工学院学报 2002:10～12
[78] 薛冬桦,赵晓敏,侯林.高铁营养酵母的摇瓶培养[J].长春工业大学学报 2003:10～13
[79] 张耀东,尹成华.几种不同酵母富硒能力的比较研究[J].粮食与饲料工业 1998:26
[80] 王伟利,钱爱东,林艳春等.酵母富集微量元素铁的研究[J].中国微生态学杂志 2002:83～ 84
[81] 李明春,姜恒等.酵母菌对重金属离子吸附的研究[J].菌物系统 1998:367～373
[82] 阎喜霜,李笑梅.高钙食用酵母的研究[J].食品与发酵工业 1994:54
[83] 李文馥.酸牛奶强化维生素C和微量元素铁的初步探讨 [J].中国公共卫生 ,1996,1 2 (4)∶ 1 63 .
[84] 王世平,周玉岩,滕冰等.酵母中有机有机有机硒转化的研究[J].东北农业大学学报 1997, 378～383
[85] 刘彦,杨志华,张明辉.利用含铬废革料制备富铬酵母的研究 (Ⅱ )———富铬酵母的制备 [J].四川大学学报(工程科学版)2004:69～73
[86] 江澜,单振秀,王宜林.利用啤酒酵母转化无机硒为有机硒研究[J].渝州大学学报(自然科学版)2000:71～74
[87] 王成涛,马玉君等.食用酵母对无机碘的转化及发酵条件的研究[J].微生物学杂志 2000: 15
[88] 罗晓玲,李元声,李益群.新疆野生葡萄酒酵母的筛选[J].20～24
[89] 薛冬桦,张恒真,金花等.糖蜜发酵培养富铬酵母[J].中国生物工程杂志 2003:98～100
[90] 王弋博,李三相等.耐盐酵母菌株的选育[J].青海大学学报(自然科学版) 2002:39～41
[91] 李爱芬,孙祖莉,陈敏等.微量元素铬载体酵母摇瓶发酵研究[J].微生物学通报 2003:18
[92] 王强,徐辉碧.微量元素硒的毒性[J].生命的化学 1994:34
[93] 王世平,周玉岩等.酵母中有机硒转化的研究[J].东北农业大学学报 1997:378～383
[94] 金婵,郝素娥,孙丽欣等. 高铬酵母的制备及其有机铬含量的研究[J].营养学报 2002: 282～285
[95] 薛冬桦,金花,肖毅.药用锌酵母培养吸收应用研究[J].中国生物工程杂志 2003:72～75
[96] 单振秀 ,江澜 ,王宜林. 富硒酵母细胞壁破碎方法的比较---细胞自溶法和酸-热破碎法 [J].西南农业大学学报 2001:365～373
[97] 贾冬舒.利用生物技术从啤酒酵母泥中提取生物蛋白质的研究[J].浙江工业大学学报 2003: 212～215
[98] 孙建义,李卫芬.啤酒酵母甘露聚糖的提取及其对鸡肠道微生物区系的影响[J].浙江大学 学报 2001:447～450
[99] 黄玲.食用酵母蛋白质的研究进展.食品与发酵工业,1992,(1):56
[100]张柏青.发酵饮料制作法.北京:中国食品出版社,1985.15
[101]北京大学生物系生物化学教组编.生物化学实验指导.北京:高等教育出版社,1990.71～ 72
[102]沈国惠.啤酒酵母自溶条件的优化及其提取物的挥发性风味成分.食品与发酵工业,1991. (3);8
[103]李艳,牟德华.啤酒酵母蛋白质的提取与精制.河北省科学院学报.1996:38～44
[104]陈南. 酵母蛋白自溶提取条件及氨基酸测定.台湾海峡.1998,12:169～173
[105]吴东儒 糖类生物化学.北京:高等教育出版社,1987
[106]张惟杰.复合多糖生化研究技术.上海:上海科技出版社,1987
[107]徐芳.硒的化学形态与生物形态分析的新技术与新方法:[博士学位论文] .复旦大学,2003
[108]丛华.铬酵母制备及稀土对有机铬含量影响的研究:[硕士学位论文].哈尔滨工业大学, 2001
[109]郝素娥,滕冰.硒酵母中硒含量测定方法的研究[J].理化检验--化学分册 1999:151～153
[110]李中来,胡予敏,刘铁英等. 酵母微量元素测定中样品消化方法的研究[J].辽宁大学学报 (自然科学版)1996:33～37
[111]扈文盛.常用食品数据手册,北京:中国食品出版社,1989:220,449
[112]王岁楼,张鑫,张平之. 红酵母类胡萝卜素提取方法研究[J]. 食品与机械 2000:30～ 31
[113]鲍改玲, 宗培,韩润平. 啤酒酵母的红外光谱研究[J].河南科学 2002:33～35
[114]韩润平,李建军,改玲. 酵母菌吸附铅前后红外光谱比较[J].光谱实验室 2000:385~387
[115]邱江,段学辉,叶勤,张嗣良.红外光谱对啤酒酵母培养过程的研究[J].光谱实验室 1998: 3～4
[116]张运涛,谷文英. 紫外分光光度法测定啤酒酵母中甘露糖[J].食品与发酵工业 32～36
[117] 丁文军,钱琴芳等. 富铬酵母的理化性质和氨基酸分析[J].微生物学通报 1999:30～33
[118] 赵华 ,靳胜英 ,张春艳等. 酿酒酵母水解物紫外吸收性能的研究[J].天津轻工业学院学报 2000:17～40
[119] 黄汝多,葛继志,李振华等. 激光在研究生物大分子结构与功能中的应用--酵母甘露聚糖 波谱性质和形成分子载体的初步研究[J].激光生物学报 1998:257～263
[120] 张秋菊,顾晓明. 钒的光度分析新进展[J]. 干旱环境监测 1999:95～98
[121] 谢芳蓉等,催化光度法测尿及水中痕量钒 化学通报刊 1981.9.531
[122] 孙林林等,催化分光光度法测人发痕量钒 工业卫生职业病 1986.12(2):108～10
[123] 程连弟等,催化极谱法测定尿中钒 工业卫生与职业病 1986.12(1):43～5
[124] 陈震阳等,萃取法无火焰原子吸收测尿中痕量钒 分析化学 1984.12(4):274～7
[125] Hiraki,k et al,Determination of trace V by addjtion of both sodium selenite and calcum chloride with polariced Zeeman effect G F.AAS. Anat.Sci.1986.2(6):561
[126] 孙大海.光谱学与光谱分析 1993;13(4):59
[127] 李明春,李登文,胡国武等.酵母菌类金属硫蛋白的分离纯化及性质鉴定[J].菌物系统 2001: 214～221
[128] 蒋夔治等,中国动物志.北京:科学出版社,1979:1566
[129] 刘征涛,周风帆等.有机毒物对水蚤的急性毒性.环境化学.1994.5:263～265
[130] 陈延君,赵勇胜等.镉和酚对多刺裸腹蚤的联合毒性试验.重庆环境科学.2003.10:10～ 11
[131] 李克才,芦荟对多刺裸腹蚤的生物学效应---种抗衰老药物的筛选试验.安徽大学学报(自 然科学版).1999.3:107～109
[2] 林杰.钒及其化合物与中毒防治[M].北京:中国标准出版社.2000.1-23,38,81～90,153～ 154
[3] 杨晓达,王夔.钒化合物生物效应的化学基础和药用前景——金属药物研究的化学问题 [J] .化学进展,2002,14(4):279～286
[4] 王云,魏复盛.土壤环境元素化学[M].北京:中国环境出版社,1995.231
[5] 迟锡增.微量元素与人体健康[M].北京:化学工业出版社,1997.101
[6] 李绍章.钒元素(V)营养研究新说.湖北畜牧兽医,1997,(2):46～47
[7] 屈健.动物必需的微量元素——钒.中国饲料,1999,(15):21～22
[8] 杨鹰,袁莉,高铭宇等.微量元素钒在动物体内的研究进展.中国兽医杂志,1999,25(8): 32～34
[9] Sabbioni E, Marafante E. Relations between iron and vanadium metabolism. The exchange of vanadium between trandferin and ferritin[J]. Toxicol Environ Health,1981,8:419～429
[10] Degani H, Gohin M, Karlish S J D, et al. Electron paramagnetic studies and insulin like effects of vanadium in raqt adipocytes [J].Biochemistry,1981,20:5795～5799
[11] Hanesn T V, Aaseth J, Alexander J. The effects of chelating agents on vanadium in the rat body and uptake by human erythrocytes[J].Arch Toxicol,1982,50;195～202
[12] Edel J, Sabbioni E. Retention of intratrachealy instilled and ingested tetravalent and pentavalent vanadium in rat[J].Trace Elem Electrolytes Health Dis,1988,21:23～30
[13] French R J, Jones P J H. Role of vanadium in nutrition: metabolism, essentiality and dietary considerations [J1. Life Sci. 1993,52: 339～346.
[14] Tsiani E, Fantus I G. Vanadium compounds. Biological actions and potential as pharmacological agents[ J ] . Trends Endocrinol Metab, 1997, 851～58.
[15] Heyligex C E, Tahiliani A G, McNeill J H. Science ,1985 ,227:1474～1477
[16] McNeill J H, Yuen V G, Hoveyda H R et al. Med .Chem., 1992,35:1489～1491
[17] Chakraborty A, Selbaraj S, Sudarshan M, et al. Modulatory role of vanadium on trace element profile in diethylnitrosamine-induced rat hepatocarcinogenesis[J]. Nuclear Instruments and Methods in Physics Research B, 2000, 170: 156～162.。
[18] Swarup G, Speeg Jr K V, Cohen S, et al. Phosphotyrosyl-protein phosphatase of TCRC-2 cells[J1.Biol. Chem. 1982, 257:7298.
[19] Dubyak G R, Kleinzeller A. The insulin-mimetic effects of vanadate in isolated rat adipocytes Dissociation from effects of vanadate as a Na-KATPase inhibitor[J]. Biol Chem,1980, 255(11): 5306～5312.
[20] 靳卫民,包承玉,邵春荣.铬矾两元素对肉鸡增重的影响[J].江苏农业科学,1996,(5):59～ 61..
[21] Cantley L C,Cantley J L,Jowephson L.A Characterization of Vanadate interactions with the (NaSK)-ATPase.J Bilo Chem,1978,253:7361～7368
[22] 黄汉生.引人注目的钒化学.国际化工信息.2002.6;10～11
[23] 盛希群,徐辉碧.非肽类胰岛素类似物的研究[J].生命的化学 2003:87～88
[24] 梅光泉,应惠芳.钒及其化合物的化学性质和生物学行为[J].微量元素与健康研究 2004.4: 57～59
[25] 颜晓平,徐建雄.钒的生物学研究作用进展[J].上海交通大学学报(农业科学版)2003.9: 253～264
[26] 杨昌英,邹雪,赵儒铭.微量元素钒铬生理生化功能对比[J].微量元素与健康研究 1 998: 76～77
[27] 赵进沛, 刘卫,陈连庆.微量元素在保健食品研制开发中的应用[J].广东微量元素科学 2000:11～14
[28] 李淑敏.酵母作为微量元素的研究及应用前景[J].微生物学通报 1999:220～222
[29] 王丽娟.酵母及其培养物在动物生产中的应用.饲料工业,1999,20(9):37～39
[30] 王进波.虾青素的开发与应用汇[J].饲料研究,2000,8:15～17.
[31] 唐传核,葛文光从活性干酵母中提取海藻搪的工艺〔J〕.无锡轻工大学学报,2000,17(3): 36～41.
[32] 朱莲珍,人和动物的微量元素营养.青岛出版社 , 1994:2 2 7～2 45
[33] 陈文根,柳启沛 ,吴鸿珍.强化蛋黄粉营养价值评价 [J].食品科学 ,1 992 ,(8)∶ 47.
[34] 李俐.应用碘强化酱油改善居民缺碘状态的可行性研究 [J].中国地方病防治杂志,1995, 10 (1 )∶41
[35] 钟炳南,邱展鸿.平衡健身盐的开发及其疗效 [J].广东微量元素科学,1995,2∶ 53
[36] 王康喜,李涛.铁强化糖果服用试验效果观察 [J]广东微量元素科学,1 997,4(1 0 )∶ 45
[37] 陈子林 .产妇功能食品的研制及其保健观察 [J].食品科学,1 994,(7)∶ 57
[38] 龙正海,硒、锗的研究开发及其在医药保健品中的地位.广东微量元素科学,1 997,4(1 )∶ 1
[39] 张亚平,陈惠琴,邱卿如.加碘食盐现场检测方法探讨.中华预防医学杂志,1 993 ,2 7(2 )∶ 110
[40] 刘晓玫.儿童补锌食品的研制 [J].食品科学,1 992 ,(4)∶ 43
[41] 潘巧仪.富微营养排米粉临床及动物实验 [J].广州医药,1 992,2 3 (5)∶ 10
[42] 田晓华.富铬酵母降低高血脂作用的研究 [J].营养学报,1 994,1 6(2 )∶ 126
[43] 唐博恒.高锗酵母的研究 [J].解放军预防医学杂志,1 994,12(3)∶ 179
[44] 黄连珍.锌酵母的代谢动力学研究 [J].卫生研究,1 994,23(3)∶ 161
[45] 柳启沛.高铁食用酵母铁资源生物利用率评价 2 .婴幼儿喂养试验 [J].营养学报 ,1990 ,12 (2 )∶172
[46] 陈季强.硒酵母对小鼠免疫功能和应激能力的影响 [J].微量元素与健康研究,1997,14(1 )∶15
[47] 张学忍,刘维强,白春祥.用酵母菌富集微量元素方法探讨 [J].微量元素与健康研,1995, 12(4)∶60
[48] 李学锋,吴法先.富硒食用菌的研究 [J].微量元素与健康研究,1 992 ,(增刊 )∶ 83
[49] 范青生.培养的富锌金针菇对小鼠学习能力和免疫功能的影响[J].营养学报,1995,17(1 )∶ 89
[50] 王淑珍.锗的粮食生物转化 [J].食品科学,1 994,(5):60 .
[51] 张之申,刘森林,刘小平.硒麦芽中淀粉酶活性初探 [J].微量元素与健康研究,1997,14(1):38
[52] 王美岭.高锌蔬菜的研究 [J],卫生研究.1991,20(1)∶29.
[53] 陈定权.微量元素肥科在农业上开发应用概况 [J].广东微量元素科学,1995,2(10)∶ 44.
[54] 王敏,姚维传.大豆施硒试验研究 [J].广东微量元素科学,1995,2(5)∶12.
[55] 耿德铨,陈绍萱,滕忠爱.多元素营养鸡蛋的研制及临床应用研究[J].广东微量元素科学 , 1994,1(5)∶ 15.
[56] 吕维影.开发单体微量元素鸡蛋的探讨 [J].食品科学,1 994,(11)∶ 61.
[57] 刘金煌.高锌蛋治疗小儿锌、铁缺乏症疗效观察 [J].微量元素与健康研究 ,1997,14(2)∶ 61 .
[58] 王广仪 ,孟献梅.蜂体生物转化法制取富硒蜜中微量元素的测定与评价 [J].江西医药 ,1994,2 9(增刊):131.
[59] 王道顺.生产高硒鸡蛋和肉的方法研究 [J].中国地方病学杂志 ,1 988,7(4)∶ 234
[60] 庞文贞,李锦等.富铬酵母的-般药理学研究[J].承德医学院学报 1996:7～10
[61] 张景媛,孟庆恒等.酵母对锗的富集作用[J].天津师大学报(自然科学版)1994:55～59
[62] 肖浩平,朱勇,张晓鸣.富铬酵母培养条件的优化[J].饲料工业 2004:35～37
[63] 郭雪娜,傅秀辉等.富锌酵母的选育及培养条件研究[J].微生物学报 2004:240～242
[64] 王晓兰,顾天成.富铬啤酒酵母发酵条件的优化[J].北京轻工业学院学报 1998:34～39
[65] 王伟利,钱爱东,林艳春等.酵母富集微量元素铁的研究[J].中国微生态学杂志 2002.4: 83～84
[66] 李明春,张丽,刑来君等.富硒酵母的筛选[J].天津轻工业学院学报 2000:25～28
[67] 郝素娥,陈庆峰,刘旭等.制备有机铬添加剂—铬酵母的研究[J].粮食与饲料工业 1999: 32～33
[68] 王凤玲,邵晓芬,王银华.富锗酵母研究[J].食品科学 2002:80-84
[69] 王盛良,黄杰,黄薇等.富铬酵母的研制[J].食品科学 2001:32-35
[70] 朱靖环,沈秋泉等.啤酒酵母富铬条件的初步研究[J].食品研究与开发 2004:49～52
[71] 徐尔尼,刘文群等.食用酵母菌对 Fe,Zn,Se 生物富集作用的研究[J].中国畜产与食品 1999: 200～202
[72] 刘静,杜连祥.—株富铬酵母的研究[J].药物生物技术 2000:173～175
[73] 王岁楼,胡巅,李玉香.活性干酵母对无机硒生物转化作用的研究[J].郑州工程学院学报 2001:55～58
[74] 朵云琨,锗和锗──硒酵母的培养及其抗氧化作用初探[J].云锡科技 1993:49～51
[75] 李云芝,康红雨等.啤酒酵母富铁、富锌的生物化特性研究[J].生物技术 1997:43
[76] 陆建安,李剑芳,袁信华.饲用硒酵母制备工艺条件的优化[J].饲料工业 2002:48
[77] 薛冬桦,陆军,金花.高铁营养酵母菌种筛选[J].吉林工学院学报 2002:10～12
[78] 薛冬桦,赵晓敏,侯林.高铁营养酵母的摇瓶培养[J].长春工业大学学报 2003:10～13
[79] 张耀东,尹成华.几种不同酵母富硒能力的比较研究[J].粮食与饲料工业 1998:26
[80] 王伟利,钱爱东,林艳春等.酵母富集微量元素铁的研究[J].中国微生态学杂志 2002:83～ 84
[81] 李明春,姜恒等.酵母菌对重金属离子吸附的研究[J].菌物系统 1998:367～373
[82] 阎喜霜,李笑梅.高钙食用酵母的研究[J].食品与发酵工业 1994:54
[83] 李文馥.酸牛奶强化维生素C和微量元素铁的初步探讨 [J].中国公共卫生 ,1996,1 2 (4)∶ 1 63 .
[84] 王世平,周玉岩,滕冰等.酵母中有机有机有机硒转化的研究[J].东北农业大学学报 1997, 378～383
[85] 刘彦,杨志华,张明辉.利用含铬废革料制备富铬酵母的研究 (Ⅱ )———富铬酵母的制备 [J].四川大学学报(工程科学版)2004:69～73
[86] 江澜,单振秀,王宜林.利用啤酒酵母转化无机硒为有机硒研究[J].渝州大学学报(自然科学版)2000:71～74
[87] 王成涛,马玉君等.食用酵母对无机碘的转化及发酵条件的研究[J].微生物学杂志 2000: 15
[88] 罗晓玲,李元声,李益群.新疆野生葡萄酒酵母的筛选[J].20～24
[89] 薛冬桦,张恒真,金花等.糖蜜发酵培养富铬酵母[J].中国生物工程杂志 2003:98～100
[90] 王弋博,李三相等.耐盐酵母菌株的选育[J].青海大学学报(自然科学版) 2002:39～41
[91] 李爱芬,孙祖莉,陈敏等.微量元素铬载体酵母摇瓶发酵研究[J].微生物学通报 2003:18
[92] 王强,徐辉碧.微量元素硒的毒性[J].生命的化学 1994:34
[93] 王世平,周玉岩等.酵母中有机硒转化的研究[J].东北农业大学学报 1997:378～383
[94] 金婵,郝素娥,孙丽欣等. 高铬酵母的制备及其有机铬含量的研究[J].营养学报 2002: 282～285
[95] 薛冬桦,金花,肖毅.药用锌酵母培养吸收应用研究[J].中国生物工程杂志 2003:72～75
[96] 单振秀 ,江澜 ,王宜林. 富硒酵母细胞壁破碎方法的比较---细胞自溶法和酸-热破碎法 [J].西南农业大学学报 2001:365～373
[97] 贾冬舒.利用生物技术从啤酒酵母泥中提取生物蛋白质的研究[J].浙江工业大学学报 2003: 212～215
[98] 孙建义,李卫芬.啤酒酵母甘露聚糖的提取及其对鸡肠道微生物区系的影响[J].浙江大学 学报 2001:447～450
[99] 黄玲.食用酵母蛋白质的研究进展.食品与发酵工业,1992,(1):56
[100]张柏青.发酵饮料制作法.北京:中国食品出版社,1985.15
[101]北京大学生物系生物化学教组编.生物化学实验指导.北京:高等教育出版社,1990.71～ 72
[102]沈国惠.啤酒酵母自溶条件的优化及其提取物的挥发性风味成分.食品与发酵工业,1991. (3);8
[103]李艳,牟德华.啤酒酵母蛋白质的提取与精制.河北省科学院学报.1996:38～44
[104]陈南. 酵母蛋白自溶提取条件及氨基酸测定.台湾海峡.1998,12:169～173
[105]吴东儒 糖类生物化学.北京:高等教育出版社,1987
[106]张惟杰.复合多糖生化研究技术.上海:上海科技出版社,1987
[107]徐芳.硒的化学形态与生物形态分析的新技术与新方法:[博士学位论文] .复旦大学,2003
[108]丛华.铬酵母制备及稀土对有机铬含量影响的研究:[硕士学位论文].哈尔滨工业大学, 2001
[109]郝素娥,滕冰.硒酵母中硒含量测定方法的研究[J].理化检验--化学分册 1999:151～153
[110]李中来,胡予敏,刘铁英等. 酵母微量元素测定中样品消化方法的研究[J].辽宁大学学报 (自然科学版)1996:33～37
[111]扈文盛.常用食品数据手册,北京:中国食品出版社,1989:220,449
[112]王岁楼,张鑫,张平之. 红酵母类胡萝卜素提取方法研究[J]. 食品与机械 2000:30～ 31
[113]鲍改玲, 宗培,韩润平. 啤酒酵母的红外光谱研究[J].河南科学 2002:33～35
[114]韩润平,李建军,改玲. 酵母菌吸附铅前后红外光谱比较[J].光谱实验室 2000:385~387
[115]邱江,段学辉,叶勤,张嗣良.红外光谱对啤酒酵母培养过程的研究[J].光谱实验室 1998: 3～4
[116]张运涛,谷文英. 紫外分光光度法测定啤酒酵母中甘露糖[J].食品与发酵工业 32～36
[117] 丁文军,钱琴芳等. 富铬酵母的理化性质和氨基酸分析[J].微生物学通报 1999:30～33
[118] 赵华 ,靳胜英 ,张春艳等. 酿酒酵母水解物紫外吸收性能的研究[J].天津轻工业学院学报 2000:17～40
[119] 黄汝多,葛继志,李振华等. 激光在研究生物大分子结构与功能中的应用--酵母甘露聚糖 波谱性质和形成分子载体的初步研究[J].激光生物学报 1998:257～263
[120] 张秋菊,顾晓明. 钒的光度分析新进展[J]. 干旱环境监测 1999:95～98
[121] 谢芳蓉等,催化光度法测尿及水中痕量钒 化学通报刊 1981.9.531
[122] 孙林林等,催化分光光度法测人发痕量钒 工业卫生职业病 1986.12(2):108～10
[123] 程连弟等,催化极谱法测定尿中钒 工业卫生与职业病 1986.12(1):43～5
[124] 陈震阳等,萃取法无火焰原子吸收测尿中痕量钒 分析化学 1984.12(4):274～7
[125] Hiraki,k et al,Determination of trace V by addjtion of both sodium selenite and calcum chloride with polariced Zeeman effect G F.AAS. Anat.Sci.1986.2(6):561
[126] 孙大海.光谱学与光谱分析 1993;13(4):59
[127] 李明春,李登文,胡国武等.酵母菌类金属硫蛋白的分离纯化及性质鉴定[J].菌物系统 2001: 214～221
[128] 蒋夔治等,中国动物志.北京:科学出版社,1979:1566
[129] 刘征涛,周风帆等.有机毒物对水蚤的急性毒性.环境化学.1994.5:263～265
[130] 陈延君,赵勇胜等.镉和酚对多刺裸腹蚤的联合毒性试验.重庆环境科学.2003.10:10～ 11
[131] 李克才,芦荟对多刺裸腹蚤的生物学效应---种抗衰老药物的筛选试验.安徽大学学报(自 然科学版).1999.3:107～109
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