应用免疫沉淀和质谱技术鉴定角蛋白1为一种新的血管内皮细胞移植抗原

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• 论文作者：郭旭丽 ; 胡娟 ; 罗伟光 ; 罗奇志 ; 郭靖 ; 田芳 ; 邹义洲
• 年：2016
• 作者机构：中南大学湘雅医学院基础医学院医学免疫学系;
• 论文关键词：人脐静脉内皮细胞(HUVEC) ; 抗内皮细胞抗体(AECA) ; 内皮细胞移植抗原 ; 角蛋白1(KRT1) ; 肾移植排斥
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R617
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：1
• 文件大小：1225k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

器官移植排斥反应仍然是移植器官存活的重要障碍,与移植排斥相关的移植抗原除ABO血型抗原,HLA和MICA多态性抗原外,还有一些Non-HLA抗原。研究表明这些抗原都与血管内皮细胞抗体(AECAs)有关,并在器官移植排斥中发挥作用,但病人血清中存在的Non-HLA抗体确切作用于何种内皮细胞(EC)表面抗原尚未完全清楚。本研究应用对肾排斥病人血清AECA抗体特异性分析,用从人脐静脉血清分离的HUEVC作为靶细胞对AECA阳性血清进行吸附和洗脱,实现了对HLA和MICA抗原捕获,成功建立了用血清抗体对靶抗原的免疫沉淀方法。我们通过免疫沉淀和质谱技术发现了一种新的内皮细胞移植抗原角蛋白1(KRT1)可能与肾移植排斥反应相关。同时我们用抗KRT1单克隆抗体检测到人脐静脉血管内皮细胞膜表面有KRT1的表达,通过基因克隆技术将人群中常见的三种KRT1多态性蛋白进行了表达和重组蛋白的分离纯化。用这种重组蛋白设计ELISA实验对肾移植病人的血清抗KRT1特异性抗体进行检测,结果显示:肾移植随访病例血清KRT1抗体阳性率为20.8%(53/255)。对肾移植后病例的血清肌酐(Cr)浓度进行分析,发现在Cr>120umol/L的病例组有29.9%(23/77)的受者被检测出存在KRT1抗体,而在Cr≤120umol/L的肾移植病例中的KRT1阳性率为16.8%(30/178),提示KRT1抗体阳性与肾移植后肾功能的慢性损伤存在统计学上的相关性(P<0.05)。进一步对高滴度KRT1抗体的特异性和相应病例的KRT1基因型进行分析,我们发现KRT1抗体属于一种抗KRT1的自身抗体。随着对临床上大样本器官移植病例回顾性调查分析,我们将揭示KRT1作为血管内皮细胞移植抗原在器官移植体液排斥中发挥作用,这为设计新的实验方法,评估器官移植风险和指导临床预防排斥用药具有重要的临床意义。

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