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大豆异黄酮干预肥胖大鼠睾酮合成与分泌相关因子的研究
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摘要
观察大豆异黄酮(SIF)干预高脂饮食肥胖大鼠后其睾丸形态结构、睾酮含量及睾酮合成与分泌关键因子的变化,为完善SIF调控雄性生殖系统生物学功能提供科学的临床实验依据。筛选20只肥胖大鼠级5只同等条件下的正常大鼠进行SIF干预实验,为期4周,按SIF剂量梯度把20只肥胖大鼠随机分为肥胖对照组(Ⅰ:0.5%羧甲基纤维素钠,n=5)、SIF低剂量组(Ⅱ:50 mg/kg·BW,n=5)、SIF中剂量组(Ⅲ:150 mg/kg·BW,n=5)、SIF高剂量组(Ⅳ:450 mg/kg·BW,n=5)和基础对照组(Ⅴ:0.5%羧甲基纤维素钠2ml/kg·BW,n=5)。HE观察大鼠睾丸形态结构;SABC免疫组化和RT-PCR法检测睾酮生物合成与分泌关键因子StAR、P450scc、P450c17、3β-HSD、17β-HSD、ANXA5的蛋白及mRNA表达水平。HE染色结果发现肥胖大鼠睾丸形态结构发生改变,生精小管壁脱落变薄,细胞层数显著减少,精原细胞数量显著减少(P<0.05),排列稀疏,生精小管萎缩。SIF各实验组肥胖大鼠睾丸形态结构完整,与肥胖对照组比较均有明显的恢复,生精细胞数量增多,小管和小管内细胞排列紧密,尤以中、高剂量组恢复较好。免疫组化SABC结果:P450scc、P450c17、3β-HSD、17β-HSD、ANXA5、StAR主要在睾丸间质细胞胞质和精原细胞胞质中表达,SIF能明显改善肥胖所致的睾酮合成关键因子表达量下降。除ANXA5外各因子、各组间的表达趋势一致:高脂对照组表达量最少,基础组和中剂量组表达最多,在低、中剂量组表达量随SIF剂量升高而增加,高剂量组阳性表达水平低于中剂量组,各组间差异显著(P<0.05)。ANXA5在睾丸内的表达与上述各关键因子不同,基础组大鼠表达量最高,高脂对照组最少,SIF各剂量组ANXA5表达量均比高脂对照组多,并呈现显著的剂量依赖性,各剂量组间差异显著(P<0.05)。补充不同剂量SIF后能剂量依赖性减脂减重。SIF可上调参与睾酮合成的各关键因子P450scc、P450c17、3β-HSD、17β-HSD、ANXA5、StAR的表达,从而维持睾丸形态结构的完整性,促进睾酮生物合成。但在SIF暴露剂量超过500mg/Kg·BW时其促恢复作用差于中剂量组,因此应关注剂量效应。
引文

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