胶胞炭疽病菌小柱孢酮脱水酶基因的克隆与敲除载体构建

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• 论文作者：刘娅楠 ; 蒲金基 ; 张贺 ; 周芳雪 ; 杨永利 ; 张恺莉 ; 刘晓妹
• 年：2016
• 作者机构：海南大学环境与植物保护学院海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所·农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室;
• 论文关键词：芒果 ; 胶孢炭疽菌 ; 小柱孢酮脱水酶基因 ; 克隆 ; 敲除载体
• 会议召开时间：2016-08-05
• 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
• 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
• 语种：中文
• 分类号：S436.67
• 学会代码：ZGVS
• 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
• 会议地点：中国江苏南京
• 主办单位：中国植物病理学会
• 学会名称：中国植物病理学会
• 页数：1
• 文件大小：43k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

芒果炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)是为害芒果的重要病害之一,主要由半知菌类炭疽菌属的胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporides Penz.)侵染引起。为了明确小柱孢酮脱水酶基因与芒果炭疽病菌致病力之间的相互关系,本实验以芒果炭疽病菌DNA为模板,利用同源克隆技术扩增该基因,分析其序列特征、推测了其蛋白的保守结构域,并借助In-Fusion(?)HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明,该基因DNA和cDNA全长分别为796bp、564bp,编码区有两个内含子(大小为52bp、180bp),推测编码187个氨基酸,其分子量约为21.52kDa,等电点PI为5.90,与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对,发现该序列与香蕉炭疽菌(C.musae)、无花果炭疽菌(C.caricae)(登录号GQ266389.1、GQ266386.1)的小柱孢酮脱水酶基因相似性分别为98%和97%。该基因的敲除载体已构建成功,为下一步获得基因敲除突变体,研究该基因功能打下了材料基础。

引文