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中国运动员尿中睾酮及代谢物同位素比值调查
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摘要
研究目的:竞技体育运动中,兴奋剂的使用严重影响着体育事业。在世界反兴奋剂机构(WADA)公布的禁用物质中,以睾酮为代表的蛋白同化制剂的滥用最严重。睾酮经代谢后从尿中排出。检测睾酮采用检测尿样中睾酮及其代谢物的同位素比值(IRMS)法。当人体摄入睾酮,尿样中一些与之相关的内源性类固醇的同位素比值会发生变化,而内源性参照物的同位素比值不会发生变化。WADA技术文件的判定标准为:当尿样中目标物的同位素比值与内源性参照物的同位素比值的差值大于阈值时,该尿样被判定为阳性。为了严厉打击兴奋剂的使用,也为了保护清白的运动员的运动生涯及荣誉,对睾酮及代谢物的同位素比值的测定及调查,了解其分布情况十分重要。研究方法:收集88名我国运动员的尿样。取样本6 mL,加入pH=7.0的磷酸盐缓冲液及葡萄糖醛酸甙酶溶液,混匀,在55℃恒温水浴中酶解3 hr,取出。加入叔丁基甲醚振荡萃取。离心,吸取上层有机溶液,吹干,加入甲醇溶解残渣,转入样品瓶中。经HPLC纯化,收集相关组分,吹干。依据IRMS测定待测物的同位素比值。选择的测定目标物为睾酮(T)及主要代谢物5a-雄烷二醇(5α-diol)、5b-雄烷二醇(5β-diol)、雄酮(An)、本胆烷醇酮(Etio)。内源性参照物为孕烷二醇(PD)和11b羟基雄酮(110H)。研究结果:本文首次统计了目前我国运动员尿样中测定物的同位素比值(%‰)的平均值(±SD)、最小值、最大值。结果为T:-22.24±1.79,最小值和最大值分别为-24.7、-18.0。5α-diol:-22.22±1.52,最小值和最大值分别为-25.6、-18.3。5β-diol:-21.71±1.56,最小值和最大值分别为-25.1、-18.1。An:-21.34±1.39,最小值和最大值分别为-24.5、-18.0。Etio:-22.26±1.30,最小值和最大值分别为-25.7、-18.6。PD:-21.09±1.37,最小值和最大值分别为-24.6、-17.8。110H:-21.01±1.53,最小值和最大值分别为-25.4、-17.6。研究结论:我国运动员尿样中睾酮及其代谢物的同位素比值的平均值与文献值相近。有些运动员的睾酮或代谢物接近正常值的下限,需进一步研究。本文对于我国运动员尿中睾酮及代谢物的同位素比进行了调查,为更好地做好兴奋剂检测打下基础。
引文

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