内质网应激调控高糖脂诱导的海马细胞炎症反应

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• 论文作者：娄淑杰 ; 蔡明 ; 李锋 ; 李静静
• 年：2016
• 作者机构：上海体育学院运动科学学院;
• 论文关键词：高糖脂 ; 海马细胞 ; ERS ; NLRP3 ; IL-1β
• 会议召开时间：2016-10-21
• 会议录名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康论文摘要汇编
• 语种：中文
• 分类号：R58
• 学会代码：ZGTK
• 会议名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康
• 会议地点：中国江苏无锡
• 主办单位：中国体育科学学会运动生理与生物化学分会
• 学会名称：中国体育科学学会
• 页数：2
• 文件大小：91k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

研究目的:高糖脂能促进海马细胞内促炎因子IL-1β的过表达而诱发炎症,而IL-1β的成熟和分泌受NLRP3炎症小体的调控。NLRP3参与了肥胖诱导的大脑炎症反应,但目前还不清楚高糖脂是否会激活大鼠海马细胞内NLRP3以促进IL-1β的表达。近期研究发现,高糖脂能诱导外周组织的内质网应激(ERS)并激活NLRP3IL-1β炎症信号通路,但高糖脂是否能诱发海马细胞ERS,其对海马细胞内该炎症通路有何影响均未见相关的研究报道。因此,本实验使用高糖脂培养基并结合使用ERS抑制剂4-PBA进行离体培养海马细胞,探讨上述研究问题。研究方法:健康新生(2d以内)SD大鼠,分离出大脑海马细胞,用基础培养基(Neurobasal培养基添加2%B27和1%青链霉素)贴壁培养5d。配制高糖脂培养基(基础培养基中添加终浓度为50mM葡萄糖和500μM棕榈酸)和ERS抑制剂培养基(高糖脂培养基中添加终浓度为20mM抑制剂4-PBA)。实验分为三组:①基础培养基对照组,②高糖脂培养基组,③ERS抑制剂组,用不同的培养基干预海马细胞6h。RT-PCR法检测海马细胞内NLRP3mRNA的表达情况,Western Blot检测海马细胞内ERS发生的标志蛋白(GRP78、p-PERK、p-IRE1α、p-eIF2α)、NLRP3和IL-1β蛋白的表达情况。每组细胞均设3个复孔,分别对应3只大鼠,所有数据用平均数±标准差表示,用SPSS20.0统计软件进行数据处理,组间比较采用单因素方差分析,p<0.05表示有统计学差异。研究结果:(1)与基础培养基组相比,高糖脂培养基组GRP78、p-PERK、p-IRE1α和p-eIF2α的蛋白表达水平显著升高(p<0.01)。(2)与基础培养基组相比,高糖脂培养基组NLRP3炎症小体的mRNA(p<0.01)和蛋白(p<0.05)表达水平显著增加,IL-1β的蛋白含量(p<0.01)也显著增加。(3)使用ERS抑制剂后,与高糖脂培养基组相比,ERS的发生程度显著降低(p<0.01)。研究结论:高糖脂能诱导海马细胞ERS和激活NLRP3,海马细胞内NLRP3-L-1β炎症信号通路受ERS的正向调控。

引文