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长春花CrCBSX3基因的克隆及功能初探
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摘要
长春花[Catharanthus roseus(L.)G.Don]是植原体繁殖过程中广泛应用的繁殖寄主,在植原体侵染后通常会表现出丛枝、花绿变及花变叶等典型症状。胱硫醚β合成酶结构域蛋白(cystathionine-synthase(CBS)domain-containing proteins,CDCPs)含有进化上保守的CBS结构域,而且在古生物、细菌和真核生物中普遍存在。CBS结构域位点的突变会导致人类的很多遗传性疾病,同时推测CBS结构域可能作为细胞能量代谢的传感器,维持细胞内的氧化还原。实验室之前分析的长春花在感染小麦蓝矮植原体后的差异表达基因中,CBS基因在小麦蓝矮植原体侵染后的表达量上升。为了研究CBS基因在小麦蓝矮植原体与长春花互作中的功能,本实验通过RACE技术,克隆到了长春花的CBSX3基因,全长1 051bp,ORF为618bp,编码205个氨基酸,由两个CBS结构域串联而成。荧光定量结果显示CrCBSX3基因在长春花嫁接小麦蓝矮植原体10天后受到强烈诱导表达;在花器官中的表达量最高,根中的表达量最低。在本氏烟叶片中瞬时表达该基因,结果显示CrCBSX3在本氏烟叶片中能够抑制BAX诱导的细胞坏死。以上实验结果表明CrCBSX3很可能在长春花与小麦蓝矮植原体的早期互作中发挥了作用。
引文

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