相思子毒素(Abrin)亲和体定点随机突变噬菌体展示文库的构建

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• 作者：高川董华重朝阳穆晞惠张金平刘志伟刘冰汪将
• 会议时间：2016-10-13
• 关键词：定点随机突变 ; 噬菌体展示文库 ; 亲和体 ; 亲和力
• 作者单位：国民核生化灾害防护国家重点实验室,北京102205
• 会议名称：2016中国环境科学学会学术年会
• 会议地点：海口
• 主办单位：中国环境科学学会
• 语种：chi
• 分类号：R97;R73

摘要

目的 构建相思子毒素亲和体定点随机突变噬菌体展示文库,并筛选出高亲和力的毒素特异识别亲和体.方法 通过定点随机突变获得亲和体基因组合,克隆于噬菌体展示载体,构建噬菌体展示随机组合亲和体文库.以相思子毒素为靶分子对该文库进行3轮亲和筛选,用ELISA鉴定毒素结合活性.结果 成功构建噬菌体展示亲和体随机组合文库,库容量为3.4 ×107,滴度为4×1014pfu/mL;获得9株高活性亲和体噬菌体抗体,测序结果表明13个位点均发生了突变,突变率100%.结论 通过亲和体噬菌体展示随机组合文库筛选获得了毒素新型抗体——亲和体,获得9种新型亲和体抗体.