细胞表面展示脂肪酶工程菌的构建及全细胞酶活性分析

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• 作者：黄彩红张慧何小松高如泰李丹席北斗
• 会议时间：2016-10-13
• 关键词：脂肪酶 ; 表面展示 ; 酶学特性
• 作者单位：中国环境科学研究院,国家环境保护地下水污染模拟与控制重点实验室 100012
• 会议名称：2016中国环境科学学会学术年会
• 会议地点：海口
• 主办单位：中国环境科学学会
• 语种：chi
• 分类号：S85;S96

摘要

为提高餐厨垃圾生物强化堆肥过程中脂肪降解效率,构建了高温期脂肪酶基因工程菌.通过醋酸锂转化法,以pYD1为穿梭质粒,将密码子改造后的脂肪酶基因lip转入表面展示载体酿酒酵母EBY100,平板检测表明重组酶具有生物学活性,在诱导后48h活性较高.进一步酶学特性分析表明:该酶最适pH为8.0;最适反应温度为55℃;1M NaCl可以刺激酶活性增加,3.5M以下保持70%以上活性,表现出较强的耐盐特性;对乙二胺四乙酸(EDTA)、十二烷基硫酸钠(SDS)、二硫苏糖醇(DTT)具有较高抗性,对咪唑、尿素抗性相对较弱.综上,该重组酶具有耐盐、耐高温、耐碱的特性,且对抑制剂和变性剂具有普遍抗性,对高温、碱性环境适应力强,具有广阔的市场应用前景.