哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建

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• 出版年：2007
• 作者：庄轩；覃映雪；苏永全；王军；丁少雄
• 单位1：厦门大学海洋与环境学院
• 出生年：1982
• 学历：硕士研究生
• 语种：中文
• 作者关键词：哈维氏弧菌；FlaA基因；基因克隆；序列分析；真核表达重组质粒
• 起始页：74
• 总页数：6
• 经费资助：国家863项目(2003AA603011)；福建省重大科技项目(2002N009)
• 刊名：海洋学报
• 是否内版：否
• 刊频：双月刊
• 创刊时间：1979
• 主管单位：中国科学技术协会
• 主办单位：中国海洋学会
• 主编：潘德炉
• 地址：北京市复兴门外大街1号
• 邮编：100860
• 卷：29
• 期：6
• 期刊索取号：P226.066449-1
• 数据库收录：中国学术期刊全文数据库全文收录期刊；中国核心期刊（遴选）数据库收录期刊；美国《化学文摘》收录期刊；《日本生物学文摘》收录期刊；中国生物学文献（遴选）数据库收录期刊
• 核心期刊：中文核心期刊；中国核心期刊（遴选）数据库收录期刊

摘要

哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌。参照基因库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因序列设计简并引物，PCR扩增哈维氏弧菌TS—628株的FlaA全基因，并克隆到pMD18-T载体中测序，经序列分析该基因全长1140bp，编码379个氨基酸．与基因库中其他弧菌的同源基因序列比较显示，哈氏弧菌FlaA基因与霍乱弧菌FLaA基因的同源性最高(79.5%)，该基因编码的多肽缺乏半胱氨酸，并在N—，C—两端的氨基酸序列较为保守，中间区域的变异较大。对该蛋白的氨基酸组成及空间结构进行了分析和预测，并推测该蛋白质的平均分子量为40.6kDa。在该基因末端加上一段编码Flag短肽的核苷酸序列后克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)，获得带哈氏弧菌鞭毛丝蛋白FlaA基因的真核表达重组质粒pcDNA—FlaA—tag，为其DNA疫苗的进一步研究奠定了基础。