大黄鱼β2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的重组表达

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• 出版年：2009
• 作者：余素红；王玉桥；陈新华
• 单位1：厦门大学生命科学学院
• 出生年：1975 1968
• 学历：博士生
• 职称：研究员 研究员
• 语种：中文
• 作者关键词：大黄鱼；β2m微球蛋白；克隆；重组表达；Western-blotting
• 起始页：13
• 总页数：6
• 经费资助：国家自然科学基金资助项目(40476052；30571439)
• 刊名：台湾海峡
• 是否内版：否
• 刊频：季刊
• 创刊时间：1982
• 主管单位：国家海洋局
• 主办单位：国家海洋局第三海洋研究所；中国海洋学会；福建省海洋学会
• 主编：余兴光
• 地址：福建省厦门市大学路178号
• 邮编：361005
• 电子信箱：twhxbjb@yahoo.com.cn
• 卷：28
• 期：1
• 期刊索取号：P226.06 792

摘要

主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）是一类高度多态的基因群，它广泛分布于各种脊椎动物体内，在启动特异性免疫应答中起关键作用。MHC根据结构分为I型和II型两种。β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2m）是MHCI型分子的轻链．本文根据大黄鱼β2m的表达序列标签(expressed sequence tags，EST)序列设计合成了特异性引物，利用RT-PCR技术从大黄鱼脾脏组织中克隆了β2m基因(Pscr-β2m)；构建了含β2m基因的原核表达载体（pGEX4T-2-β2m），在0.1mmoI/dm3IPTG诱导下重组β2m得到了表达；采用Sepharose4B亲合层析纯化目的蛋白并制备了抗体；Western-blotting分析证实了该抗体具有与天然大黄鱼脾脏组织中l32m蛋白反应的特性。这些结果为进一步研究鱼类β2m结构与功能的关系，以及制备MHCI类分子四聚体奠定基础。