银腺杨优良无性系HYS-1叶片再生体系的建立
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摘要
以银腺杨无性系HYS-1组培苗叶片为材料,MS为基本培养基,通过单因素试验及正交试验L_(16)(4~5),探究不同浓度TDZ、6-BA以及不同生长素种类对银腺杨无性系HYS-1叶片再生体系建立的影响并筛选最佳培养基。结果表明:不定芽主茎高于1cm的芽占总芽数的比率随TDZ浓度的增加而降低。不定芽再生频率随6-BA浓度的增加而降低。在TDZ(0.05～0.10)mg/L+6-BA(0.50～1.50)mg/L的范围内,叶片通过愈伤组织间接诱导大量不定芽,无明显主茎;只有6-BA(0.50～1.50)mg/L时叶片直接诱导不定芽,且主茎明显。叶片基部是最佳不定芽诱导位置;TDZ 0.05mg/L+6-BA 0.30mg/L+NAA 0.05mg/L处理15d后即出现不定芽,且主茎较高,是银腺杨无性系HYS-1叶片诱导不定芽再生的最佳培养基。再生不定芽在1/2MS+0.50mg/L IBA生根培养基上,5d开始生根,生根率95%以上。
Using tissue culture seedling leaves of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa as material and MS as basic medium,through single factor test and orthogonal test L_(16)(4~5),exploring the influence of different concentrations of TDZ,6-BA and different kinds of growth elements on the establishment of leaf regeneration system of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa was investigated and the best medium was selected.The results showed that the proportion of adventitious buds whose main stem was more than 1 cm to the total number of buds decreased with the increase of TDZ concentration. The frequency of adventitious bud regeneration decreased with the increase of 6-BA concentration. Within the range of 6-BA(0.50～1.50)mg/L+TDZ(0.05～0.10)mg/L,a large number of adventitious buds were indirectly induced from leaves through callus,but there was no obvious main stem;only 6-BA(0.50～1.50)mg/L could induce adventitious buds directly from leaves,and the main stem was obvious. The base of leaves was the best position for adventitious bud induction; adventitious buds appeared 15 days after treatment with 0.05 mg/L TDZ+0.30 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,and the main stem was higher,which was the best medium for leaf induction of adventitious bud regeneration of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa. The regenerated adventitious buds began to take root on 1/2 MS+0.50 mg/L IBA rooting medium for 5 days,and the rooting rate was over 95%.
Using tissue culture seedling leaves of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa as material and MS as basic medium,through single factor test and orthogonal test L_(16)(4~5),exploring the influence of different concentrations of TDZ,6-BA and different kinds of growth elements on the establishment of leaf regeneration system of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa was investigated and the best medium was selected.The results showed that the proportion of adventitious buds whose main stem was more than 1 cm to the total number of buds decreased with the increase of TDZ concentration. The frequency of adventitious bud regeneration decreased with the increase of 6-BA concentration. Within the range of 6-BA(0.50～1.50)mg/L+TDZ(0.05～0.10)mg/L,a large number of adventitious buds were indirectly induced from leaves through callus,but there was no obvious main stem;only 6-BA(0.50～1.50)mg/L could induce adventitious buds directly from leaves,and the main stem was obvious. The base of leaves was the best position for adventitious bud induction; adventitious buds appeared 15 days after treatment with 0.05 mg/L TDZ+0.30 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,and the main stem was higher,which was the best medium for leaf induction of adventitious bud regeneration of Clone HYS-1 of Populus alba × P.glandulosa. The regenerated adventitious buds began to take root on 1/2 MS+0.50 mg/L IBA rooting medium for 5 days,and the rooting rate was over 95%.
引文
[1]刘文国，张旭东，黄玲玲，等.我国杨树生理生态研究进展[J].世界林业研究，2010,23(1):50-57.
[2]庞发虎，杨建伟，庞振凌，等.杨树生理生态指标与环境因子之间相关性分析[J].生态学报，2010,30(12):3188-3197.
[3]周厚君，魏凯莉，江成，等.杨树GRF1/2d负调控不定根的发生和发育[J].林业科学，2017,53(3):33-37.
[4]李科友，樊军锋，赵忠，等.银腺杨转Cry IAc和API双价抗虫基因的研究[J].林业科学研究，2007,20(5):699-704.
[5]李慧.两个白杨派树种组织培养快繁技术研究[D].西安：西北农林科技大学，2012.
[6]马同富，马宗新.杨树叶片高效离体再生系统的构建[J].中国农学通报，2007,23(12):87-92.
[7]丁依，巩彦西，欧品莉，等.杨树组织培养研究综述[J].天津农业科学，2018,24(11):82-85.
[8]姜福星，黄远祥，周鹏，等.植物叶片再生的探究[J].分子植物育种，2018,16(20):6832-6839.
[9]李慧，陈晓阳，李云，等.银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究[J].北京林业大学学报，2004,26(3):46-50.
[10]刘翠琼，汤浩茹，罗娅，等.不同基因型梨叶片离体培养和植株再生[J].园艺学报，2005(6):46-50.
[11]吕晋慧，吴月亮，孙磊，等．菊花叶片不定芽再生体系的研究[J].北京林业大学学报，2005,27(4):97-100.
[12]姚娜，张志毅，安新民，等.毛白杨叶片离体再生培养的基因型效应[J].北京林业大学学报，2007(5):44-49.
[13]陈宗礼，齐向英，张向前，等.TDZ和6-BA对枣树继代培养的影响[J].西北农业学报，2006,15(3):162-281.
[14]李艳，王青，李洪艳，等.正交设计在毛白杨组织培养中的应用[J].辽宁师范大学学报（自然科学报），2004,24(3):334-335.
[15]Huetteman C A,Preece J E.TDZ:a potent cytokininforwoody plant tissue culture[J].Plant Cell Tissue Organ Cult,1993,33(2):105-119.
[16]徐晓峰，黄学林.TDZ：一种有效的植物生长调节剂[J].植物学通报.2003,20(2):227-237.
[17]丁霞，陈晓阳，李云，等.胡杨叶片不定芽再生体系的研究[J].北京林业大学学报，2003,25(2):28–31.
[18]沈效东，张新宁，袁世杰，等.生长调节剂对毛白杨叶愈伤组织诱导和植株再生的影响[J].宁夏农林科技，1996(6):18-20.
[19]韩向峰，李志芳，曹琴，等.农大5号钙果叶片芽诱导及其植株再生研究[J].广东农业科学，2018,45(8):37-42.
[20]高天舒.玉露（Haworthiacooperivar.piliferaM.B.Bayer）叶片离体再生研究[D].沈阳：沈阳农业大学园艺学院，2018.
[21]孙贝贝，刘杰，葛亚超，等.植物再生的研究进展[J].科学通报.2016,61(36):3887-3902.
[22]师校欣，杜国强，马宝焜，等.甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生[J].果树学报. 2006,23(4):538-541.
[23]赵盈盈，彭尽晖，陈小超，等.八仙花叶片诱导再生技术[J].湖南农业科学，2015(4):81-84.
[24]李玉玲，王三红，刘莉莉，等.澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立[J].江苏农业学报，2008,24(1):48-52.
[25]贾小明，樊军锋，王娟娟.河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽研究[J].西北农林科技大学学报（自然科学版），2004,26(3):110-115.
[26]常新，梁晋军，刘振华，等.黑香蕉葡萄不同器官发生途径再生体系的优化[J].中国农业大学学报，2018,23(9):43-52.
[27]邱义兰，陈冰，廖丽娟，等.兔眼蓝莓离体叶片再生组织细胞学观察[J].生命科学研究，2016,20(6):516-520.
[2]庞发虎，杨建伟，庞振凌，等.杨树生理生态指标与环境因子之间相关性分析[J].生态学报，2010,30(12):3188-3197.
[3]周厚君，魏凯莉，江成，等.杨树GRF1/2d负调控不定根的发生和发育[J].林业科学，2017,53(3):33-37.
[4]李科友，樊军锋，赵忠，等.银腺杨转Cry IAc和API双价抗虫基因的研究[J].林业科学研究，2007,20(5):699-704.
[5]李慧.两个白杨派树种组织培养快繁技术研究[D].西安：西北农林科技大学，2012.
[6]马同富，马宗新.杨树叶片高效离体再生系统的构建[J].中国农学通报，2007,23(12):87-92.
[7]丁依，巩彦西，欧品莉，等.杨树组织培养研究综述[J].天津农业科学，2018,24(11):82-85.
[8]姜福星，黄远祥，周鹏，等.植物叶片再生的探究[J].分子植物育种，2018,16(20):6832-6839.
[9]李慧，陈晓阳，李云，等.银白杨叶片不定芽再生影响因素的研究[J].北京林业大学学报，2004,26(3):46-50.
[10]刘翠琼，汤浩茹，罗娅，等.不同基因型梨叶片离体培养和植株再生[J].园艺学报，2005(6):46-50.
[11]吕晋慧，吴月亮，孙磊，等．菊花叶片不定芽再生体系的研究[J].北京林业大学学报，2005,27(4):97-100.
[12]姚娜，张志毅，安新民，等.毛白杨叶片离体再生培养的基因型效应[J].北京林业大学学报，2007(5):44-49.
[13]陈宗礼，齐向英，张向前，等.TDZ和6-BA对枣树继代培养的影响[J].西北农业学报，2006,15(3):162-281.
[14]李艳，王青，李洪艳，等.正交设计在毛白杨组织培养中的应用[J].辽宁师范大学学报（自然科学报），2004,24(3):334-335.
[15]Huetteman C A,Preece J E.TDZ:a potent cytokininforwoody plant tissue culture[J].Plant Cell Tissue Organ Cult,1993,33(2):105-119.
[16]徐晓峰，黄学林.TDZ：一种有效的植物生长调节剂[J].植物学通报.2003,20(2):227-237.
[17]丁霞，陈晓阳，李云，等.胡杨叶片不定芽再生体系的研究[J].北京林业大学学报，2003,25(2):28–31.
[18]沈效东，张新宁，袁世杰，等.生长调节剂对毛白杨叶愈伤组织诱导和植株再生的影响[J].宁夏农林科技，1996(6):18-20.
[19]韩向峰，李志芳，曹琴，等.农大5号钙果叶片芽诱导及其植株再生研究[J].广东农业科学，2018,45(8):37-42.
[20]高天舒.玉露（Haworthiacooperivar.piliferaM.B.Bayer）叶片离体再生研究[D].沈阳：沈阳农业大学园艺学院，2018.
[21]孙贝贝，刘杰，葛亚超，等.植物再生的研究进展[J].科学通报.2016,61(36):3887-3902.
[22]师校欣，杜国强，马宝焜，等.甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生[J].果树学报. 2006,23(4):538-541.
[23]赵盈盈，彭尽晖，陈小超，等.八仙花叶片诱导再生技术[J].湖南农业科学，2015(4):81-84.
[24]李玉玲，王三红，刘莉莉，等.澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立[J].江苏农业学报，2008,24(1):48-52.
[25]贾小明，樊军锋，王娟娟.河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽研究[J].西北农林科技大学学报（自然科学版），2004,26(3):110-115.
[26]常新，梁晋军，刘振华，等.黑香蕉葡萄不同器官发生途径再生体系的优化[J].中国农业大学学报，2018,23(9):43-52.
[27]邱义兰，陈冰，廖丽娟，等.兔眼蓝莓离体叶片再生组织细胞学观察[J].生命科学研究，2016,20(6):516-520.