不同居群栝楼遗传多样性的研究
|
摘要
栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.为葫芦科栝楼属植物,雌雄异株,多年生草质藤本,以果实(瓜蒌)、根(天花粉)和种子(瓜蒌子)入药。栝楼在全国各地均有种植,多生于山坡、山谷、灌丛和林缘等温暖湿润的地方,种质资源非常丰富。目前对栝楼的研究多集中在栝楼属植物的分类、不同栽培种的比较鉴别、药材真伪品的鉴别、从药用部位(根及种子)中提取核糖体失活蛋白以及天花粉的临床应用等。以采集于不同地区的野生栝楼为材料,系统地对不同居群栝楼的物候期进行观察比较,并从形态学、组织学、孢粉学和生化学等方面研究栝楼种内不同居群遗传多样性的研究尚属首次。
本研究从河南、河北、湖北和贵州等地共采集了14个居群的野生栝楼资源,对其进行物候期的观察比较。另外,对形态学、组织学、孢粉学和生化学等方面得出的结果进行主成分分析和聚类分析,综合探究了栝楼种内不同居群的遗传多样性,并对14个居群栝楼的亲缘关系进行了推测。
1.全面地对不同居群栝楼的物候期进行观察比较,发现不同居群栝楼的芽膨大期、芽开放期、展叶期和展叶盛期较为一致,不同居群栝楼的现蕾期及盛花期有较大差别。栝楼发芽与展叶的时期多集中在3月份,开花期在5～6月份,果实成熟及采摘期在10～11月份,落叶期则从11月下旬持续到12月底。栝楼的结果期一般在151.5～173.5天之间,全生育期一般在275～294.7天之间,不同居群之间的结果期与全生育期差异较大。
在生产上,10℃是栝楼芽膨大和开放的最低温度,25℃是栝楼开花的最适温度。在品种选育时,如要以果实早熟为培育目标,则应选择发芽较早,果实成熟较早的品种。如要以景观植物为选育目标,则应该选择展叶盛期持续时间长,落叶较晚的品种。
2.不同居群栝楼的植物学性状均存在较大的变异,这种变异不仅体现在不同居群中,还体现在同一居群的不同植株中,反映出栝楼丰富的遗传多样性。
对植物学性状的调查结果进行主成分分析,反映栝楼整体性状信息贡献率最大的3个主成分,其累计贡献率仅为44.46%,未达到累计贡献率应大于80%的认可标准,反映不了原始变量的全部信息。通过聚类分析将14个居群栝楼归为3类。
3.首次对不同居群栝楼的叶表皮进行显微观察,观察发现不同居群栝楼叶表皮的细胞及气孔形态高度一致,而不同居群栝楼的表皮细胞和气孔的大小、气孔指数有差异。叶表皮气孔及表皮细胞形态、气孔密度和气孔指数可以作为栝楼遗传多样性研究的指标。
4.针对前人多将栝楼放在葫芦科、栝楼属和瓜类的大范围中进行研究,本研究主要侧重于对栝楼种内不同居群的花粉形态进行比较观察。研究发现花粉形态、表面纹饰和萌发沟类型高度一致,而花粉大小、萌发沟的数目及长短不同。花粉形态和表面纹饰是不同居群作为同种植物所具备的共同特征;花粉大小及萌发沟形态的差异则体现出不同居群的差异,可以作为研究栝楼遗传多样性的指标。
5.对不同居群栝楼种子可溶性蛋白质及叶片酯酶同工酶电泳进行研究,发现在蛋白质电泳图谱中不同居群栝楼存在2条共有谱带,YC、XY-2和Gz分别存在1条本身特异的谱带。不同居群栝楼种子可溶性蛋白质电泳谱带相似系数在0.316～1.000之间。在酯酶同工酶电泳中不同居群栝楼存在1条共有谱带,NX-1和XH分别存在1条本身特异的谱带。不同居群栝楼叶片酯酶同工酶电泳谱带相似系数在0.400～1.000之间。2份电泳图谱中的谱带均具有多态性。蛋白质电泳很好地反映出不同居群的采集地与亲缘关系之间的相关性。
6.综合考虑5个聚类结果,同采集于河南内乡的NX-1、NX-2 5次都被分成一类,二者的亲缘关系较近,且能稳定的表现在基因及外在形态上。XY-2和HC的亲缘关系最远。
Trichosanthes kirilowii Maxim. is one kind of dioecism liana in cucurbitaceae. Its fruit, root tuber and seed are traditional Chinese materia medica. T. kirilowii grows in hillside, valley, brushwood, forest edge etc... It can be planted in most parts of China, so that the germplasm resource is really rich. The current research on T. kirilowii is focus on the classification of Trichosanthes., comparison of different cultivated species, identification of true or false medicinal, extraction of RIPs from T. kirilowii, and clinical application of Tianhuafen, etc... In this study, the observation of phenophases on different populations of T. kirilowii, and analysis of genetic diversity and sidship of different populations of T. kirilowii from morphology, histology, palynology and biochemistry were conducted.
We collected 14 populations of wild T. kirilowii from Henan, Hebei, Hubei and Guizhou provinces. Phenophases and botanical characters of different populations of T. kirilowii were observed. Beside, the genetic diversity of different populations of T. kirilowii was studied on the level of morphology, histology, palynology and biochemistry. And, the sidship among 14 populations of T. kirilowii was speculated. Following are the results:
1. The phenophases of different populations of T. kirilowii were observed. The budding phase, leafing phase, peak leafing phase of 14 populations of T. kirilowii are almost the same. But, flowering phase and peak flowering phase of different populations is quite different. The budding phase and leafing phase occur in March. The most populations' flowering phase start from early May, a week later, they enter into peak flowering phase. Fruiting phase is form late October to November mid-term, and leaf falling phase is from late November to December. The fruit season of T. kirilowii is from 151.5 to 173.5 day, and whole duration is from 275 to 294.7 day. The significant difference could be found among 14 populations.
10℃is the lowest temperatures for bud expanding and openning of T. kirilowii, and 25℃is the optimum temperatures for flowering of T. kirilowii. If the goal of seed-breeding is fruit harvest, we can select the varieties whose fruit maturity is earlier. If the goal of seed-breeding is oranament, we can choose the varieties whose leafing phase is longer and leaf falling phase is later.
2. 48 botanical characters of different populations of T. kirilowii were analyzed. The variation of mostly botanical characters is great. The variation not only exists in different populations of T. kirilowii, but also in different plants in the same population.
48 botanical characters were analyzed by principal component analysis. The result showed that the cumulated variance contribution ratio of the firstly three principal components is 44.46%. It can't represent the whole message of original variables. The 14 populations could be divided into 3 types by clusting analysis.
3. The observation of leaf epidermis of different populations of T. kirilowii was conducted for the first time in the research of T. kirilowii. Different populations are similar in morphology of stomata and epidermal cell, but different in size and density. The results showed that the morphology of stomata and epidermal cell could be the common character of T. kirilowii, and the size and density differences between geographical populations could show their species biodiversity.
4. The observation of pollen morphology of different populations of T. kirilowii was conducted for the first time in the research of T. kirilowii. Different populations are similar in shape and surface omamentation, but different in body size and germinator. The results indicated that the morphology of shape and surface omamentation could be the common character of T. kirilowii, and the difference in size and germinator between geographical populations could show the species biodiversity.
5. The electrophoresis pattern of proteins and esterase isozyme were analyzed. Different populations had not only common bands, but also specific bands. The electrophoresis pattern of proteins showed that the genetic relationship is related to region.
6. The results of 5 clusting analysis were compared. The result showed that the sidship between NX-1 and NX-2 was the nearest, and the sidship between XY-2 and HC was the furthest.
本研究从河南、河北、湖北和贵州等地共采集了14个居群的野生栝楼资源,对其进行物候期的观察比较。另外,对形态学、组织学、孢粉学和生化学等方面得出的结果进行主成分分析和聚类分析,综合探究了栝楼种内不同居群的遗传多样性,并对14个居群栝楼的亲缘关系进行了推测。
1.全面地对不同居群栝楼的物候期进行观察比较,发现不同居群栝楼的芽膨大期、芽开放期、展叶期和展叶盛期较为一致,不同居群栝楼的现蕾期及盛花期有较大差别。栝楼发芽与展叶的时期多集中在3月份,开花期在5～6月份,果实成熟及采摘期在10～11月份,落叶期则从11月下旬持续到12月底。栝楼的结果期一般在151.5～173.5天之间,全生育期一般在275～294.7天之间,不同居群之间的结果期与全生育期差异较大。
在生产上,10℃是栝楼芽膨大和开放的最低温度,25℃是栝楼开花的最适温度。在品种选育时,如要以果实早熟为培育目标,则应选择发芽较早,果实成熟较早的品种。如要以景观植物为选育目标,则应该选择展叶盛期持续时间长,落叶较晚的品种。
2.不同居群栝楼的植物学性状均存在较大的变异,这种变异不仅体现在不同居群中,还体现在同一居群的不同植株中,反映出栝楼丰富的遗传多样性。
对植物学性状的调查结果进行主成分分析,反映栝楼整体性状信息贡献率最大的3个主成分,其累计贡献率仅为44.46%,未达到累计贡献率应大于80%的认可标准,反映不了原始变量的全部信息。通过聚类分析将14个居群栝楼归为3类。
3.首次对不同居群栝楼的叶表皮进行显微观察,观察发现不同居群栝楼叶表皮的细胞及气孔形态高度一致,而不同居群栝楼的表皮细胞和气孔的大小、气孔指数有差异。叶表皮气孔及表皮细胞形态、气孔密度和气孔指数可以作为栝楼遗传多样性研究的指标。
4.针对前人多将栝楼放在葫芦科、栝楼属和瓜类的大范围中进行研究,本研究主要侧重于对栝楼种内不同居群的花粉形态进行比较观察。研究发现花粉形态、表面纹饰和萌发沟类型高度一致,而花粉大小、萌发沟的数目及长短不同。花粉形态和表面纹饰是不同居群作为同种植物所具备的共同特征;花粉大小及萌发沟形态的差异则体现出不同居群的差异,可以作为研究栝楼遗传多样性的指标。
5.对不同居群栝楼种子可溶性蛋白质及叶片酯酶同工酶电泳进行研究,发现在蛋白质电泳图谱中不同居群栝楼存在2条共有谱带,YC、XY-2和Gz分别存在1条本身特异的谱带。不同居群栝楼种子可溶性蛋白质电泳谱带相似系数在0.316～1.000之间。在酯酶同工酶电泳中不同居群栝楼存在1条共有谱带,NX-1和XH分别存在1条本身特异的谱带。不同居群栝楼叶片酯酶同工酶电泳谱带相似系数在0.400～1.000之间。2份电泳图谱中的谱带均具有多态性。蛋白质电泳很好地反映出不同居群的采集地与亲缘关系之间的相关性。
6.综合考虑5个聚类结果,同采集于河南内乡的NX-1、NX-2 5次都被分成一类,二者的亲缘关系较近,且能稳定的表现在基因及外在形态上。XY-2和HC的亲缘关系最远。
Trichosanthes kirilowii Maxim. is one kind of dioecism liana in cucurbitaceae. Its fruit, root tuber and seed are traditional Chinese materia medica. T. kirilowii grows in hillside, valley, brushwood, forest edge etc... It can be planted in most parts of China, so that the germplasm resource is really rich. The current research on T. kirilowii is focus on the classification of Trichosanthes., comparison of different cultivated species, identification of true or false medicinal, extraction of RIPs from T. kirilowii, and clinical application of Tianhuafen, etc... In this study, the observation of phenophases on different populations of T. kirilowii, and analysis of genetic diversity and sidship of different populations of T. kirilowii from morphology, histology, palynology and biochemistry were conducted.
We collected 14 populations of wild T. kirilowii from Henan, Hebei, Hubei and Guizhou provinces. Phenophases and botanical characters of different populations of T. kirilowii were observed. Beside, the genetic diversity of different populations of T. kirilowii was studied on the level of morphology, histology, palynology and biochemistry. And, the sidship among 14 populations of T. kirilowii was speculated. Following are the results:
1. The phenophases of different populations of T. kirilowii were observed. The budding phase, leafing phase, peak leafing phase of 14 populations of T. kirilowii are almost the same. But, flowering phase and peak flowering phase of different populations is quite different. The budding phase and leafing phase occur in March. The most populations' flowering phase start from early May, a week later, they enter into peak flowering phase. Fruiting phase is form late October to November mid-term, and leaf falling phase is from late November to December. The fruit season of T. kirilowii is from 151.5 to 173.5 day, and whole duration is from 275 to 294.7 day. The significant difference could be found among 14 populations.
10℃is the lowest temperatures for bud expanding and openning of T. kirilowii, and 25℃is the optimum temperatures for flowering of T. kirilowii. If the goal of seed-breeding is fruit harvest, we can select the varieties whose fruit maturity is earlier. If the goal of seed-breeding is oranament, we can choose the varieties whose leafing phase is longer and leaf falling phase is later.
2. 48 botanical characters of different populations of T. kirilowii were analyzed. The variation of mostly botanical characters is great. The variation not only exists in different populations of T. kirilowii, but also in different plants in the same population.
48 botanical characters were analyzed by principal component analysis. The result showed that the cumulated variance contribution ratio of the firstly three principal components is 44.46%. It can't represent the whole message of original variables. The 14 populations could be divided into 3 types by clusting analysis.
3. The observation of leaf epidermis of different populations of T. kirilowii was conducted for the first time in the research of T. kirilowii. Different populations are similar in morphology of stomata and epidermal cell, but different in size and density. The results showed that the morphology of stomata and epidermal cell could be the common character of T. kirilowii, and the size and density differences between geographical populations could show their species biodiversity.
4. The observation of pollen morphology of different populations of T. kirilowii was conducted for the first time in the research of T. kirilowii. Different populations are similar in shape and surface omamentation, but different in body size and germinator. The results indicated that the morphology of shape and surface omamentation could be the common character of T. kirilowii, and the difference in size and germinator between geographical populations could show the species biodiversity.
5. The electrophoresis pattern of proteins and esterase isozyme were analyzed. Different populations had not only common bands, but also specific bands. The electrophoresis pattern of proteins showed that the genetic relationship is related to region.
6. The results of 5 clusting analysis were compared. The result showed that the sidship between NX-1 and NX-2 was the nearest, and the sidship between XY-2 and HC was the furthest.
引文
1.埃尔塔曼 G.孢粉学手册.中国科学院植物研究所古植物研究室孢粉组译.北京:科学出版社.1978
2.安巍,赵建华,石志刚,焦恩宁.枸杞种质资源果实数量性状评价指标探讨.果树学报,2007,24(2):172-175
3.白晓雷.二年生沙芥物候期观察及不同生育期营养成分分析.[硕士学位论文].内蒙古:内蒙古农业大学.2007
4.蔡宝炎.32份中国南瓜种质资源的遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2006
5.蔡健,兰伟,罗瑞丽,李飞天,闻峰.皖北小麦主栽品种遗传多样性的系统聚类法分析.中国农学通报,2006,22(11):143-147
6.蔡秀珍,刘克明,丛义艳,陈薇.风仙花属(Impatiens L.)10种植物花粉形态的扫描电镜观察.植物研究,2007,27(3):279-283
7.蔡永敏,侯惠鸣.天花粉名称考释.陕西中医,2003,24(5):457-458
8.陈诚.栝楼、附子、决明、白花蛇草高校栽培技术.河南科学技术出版社,2004:13-14
9.陈存武,李耀亭,周守标.大别山5种黄精属植物叶表皮的初步比较研究.安徽农业大学学报,2006,33(1):108-112
10.陈惠明,周长久.萝卜酯酶同工酶与品种亲缘关系的研究.湖南农业大学学报,1999,25(3):191-194
11.陈亮,童启庆.山茶属8种1变种变种形态比较.茶叶科学,1997,17(2):183-188
12.陈沁滨,侯喜林,张波,杨金明,冷月强,蒋芳玲.洋葱种质资源数量性状的主成分分析和聚类分析.江苏农业学报,2007,23(4):376-378
13.陈四龙,李玉荣,程增书,徐桂真.花生品种(系)生物学性状的主成分分析和聚类分析.花生学报,2007,36(2):28-34
14.邓小燕,周颂东,何兴金.中国黄精属13种植物花粉形态及系统学研究.武汉植物学研究,2007,25(1):11-18
15.董诚明,苏秀红,李增光,程书辉.两种冬凌草种子的生物学特性及蛋白质电泳的比较研究.河南科学,2008,26(1):39-42
16.董婷霞,徐国均,金蓉鸾,徐珞珊.栝楼属种子类药材的蛋白电泳鉴别.中国药科大学学报.1990,21(4):249-250
17.杜娟.不同居群半夏综合性状的比较研究.[硕士学位论文].北京:首都师范大学,2006
18.段琦梅.黄芪生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2005
19.樊建峰,李绍稳,朱立武,等.红籽瓜数量性状的主成分与聚类分析.中国农学通报,2006,22(2):301-304
20.方从兵.我国果树孢粉学研究进展.安徽农业大学学报,2002,29(2):154-157
21.郭法杰.瓜蒌属药用植物研究概述.中医药临床杂志,2007,19(4):419-412
22.郭贵敏.21个花生地方品种的数量性状分析和聚类分析.花生学报,2004,33(3):29-31
23.郭军.西瓜种质资源的遗传亲缘关系与品种的分子鉴定研究.[硕士学位论文].杭州:浙江大学.2001
24.郭丽秀,卫兆芬.国产省藤属植物的叶表皮形态学.热带亚热带植物学报,2005,13(4):277-284
25.郭巧生,王庆亚,史红专.半夏种内不同居群花粉粒形态比较研究.中国中药杂志,2006,31(1):27-31
26.郭庆海,王康才,唐晓清.不同栽培居群菘蓝花粉的扫描电镜观察.中国中药杂志,2008,33(11):1322-1325
27.郭庆梅,周凤琴,李定格,张永清.瓜萎的名称、原植物和产地的本草考证,中医研究,2006,19(3):28-29
28.郭庆梅,周凤琴,杨金玲,高慧.山东栽培瓜蒌果皮超微形态的初步研究.中国中药杂志,2005,30(20):1580-1582
29.郭庆梅,周凤琴,张卉,张永清.瓜蒌的药用部位、采收加工和功效的考证.中医药学刊,2006,24(10):1824-1827
30.何和明.石榴种内不同居群酯酶同工酶酶谱特征分析.海南师范学院学报(自然科学版),2006,19(3):269-273
31.胡玉涛,王沫,肖平阔.应用栝楼进行郊区绿化的探讨.中国林副特产,2006,10(5):81-83
32.胡志昂,王洪新.蛋白质多样性和品种鉴定.植物学报,1991,33(7):556-564.
33.黄璐琦,乐崇熙,杨滨.栝楼属药用植物资源调查.中国中药杂志,1995,20(4):195-198
34.黄璐琦,乐崇熙,杨滨.栝楼属(Trichosanthes L.)的系统学研究.江西中医学院学报,1999,11(2):75-79
35.黄璐琦,乐崇熙,郑俊华,诚静容.栝楼属种皮的扫描电镜观察及其分类学意义.植物研究,1999,19(3):298-301
36.黄璐琦,杨滨,乐崇熙,诚静容.栝楼属花粉形态研究及其在分类学上的意义.植物分类学报,1997,35(2):125-135
37.黄璐琦,乐崇熙,李懋学.栝楼属8种植物的染色体数目.云南植物研究,1994,16(1):95-96
38.黄璐琦,王敏,杨滨.栝楼农家品种苗期的分子标识鉴别.中国药学杂志,1999,34(9):642
39.金凤媚,薛俊,郏艳红,刘仲齐.番茄遗传资源的聚类分析研究.华北农学报,2006,21(6):49-54
40.孔秋生.萝卜种质资源遗传多样性和亲缘关系研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2003
41.蓝盛银,徐珍秀.植物花粉剥离观察扫描电镜图解.北京:科学出版社,1996,47-48
42.乐崇熙,冯学锋,黄璐琦.18种瓜萎皮组织学研究.中国中药杂志,1999,24(11):646-710
43.乐崇熙,黄璐琦,殷晓杰.18种瓜蒌皮的形态学研究.中国中药杂志,1999,24(7):396-397
44.雷泞菲,苏智先,陈劲松.同工酶技术在植物研究中的应用[J].四川师范学院学报(自然科学版),2000,21(4):321-325.
45.李爱花,管开云,王仲朗.斑龙芋属(天南星科)及近缘属植物的叶表皮形态.云南植物研究,2005,27(6):629-638
46.李先恩,祁建军,周丽莉,杨世林.地黄种质资源形态及生物学性状的观察与比较.植物遗传资源学报,2007,8(1):95-98
47.李晓红,潘超,尹莉娟,邵剑文,张小平.濒危植物黄山梅及其相关植物的叶表皮特征研究.安徽师范大学学报(自然科学版),2005,28(3):329-332
48.黎茵,黄上志,傅家瑞.不同品种花生种子蛋白质的电泳分析.植物学报,1998,40(6):534-541
49.刘昌文,丁志祥,程昌文.柑橘属叶片酯酶同工酶和蛋白质电泳分析.西南农业学报.1997,10(4):70-75
50.刘剑锋,柳福柱,程云清,程军.5种秋子梨品种的花粉形态观察.西北农林科技大学学报(自然科学版),2006,34(5):153-157
51.刘文婷.丹参的生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2004
52.刘晓虹,宋勇,陈惠明.黄瓜种质资源亲缘关系的聚类分析.湖南农业科学,2001,6:9-11
53.刘晓梅,潘建平,曾杨,林志雄,匡石滋,田世尧,姜玲.黄皮种质资源的RAPD分析.广东农业科学,2007,2:13-16
54.林新春,俞志雄.9种木兰科植物的花粉形态观察.浙江林学院学报,2003,20(4):353-356
55.陆嘉惠,李学禹,周玲玲,吴玲.甘草属植物叶表皮特征及其系统学意义.云南植物研究,2005,27(5):525-533
56.梅莉娟.中国郁金香属植物物候特征及居群形态分化.[硕士学位论文].新疆:新疆农业大学,2006
57.宁志怨,董玲,陈静娴,廖华俊,江芹,孙涌潮.栝楼种质资源亲缘关系的RAPD分析.安徽农业大学学报,2007,34(4):560-563
58.潘建国.试论应用孢粉学及其新进展.微体古生物学报,2006,19(2):206-214
59.潘月红,刘克明,雷立公.菖蒲属和天南星科5属植物叶表皮的比较.湖南师范大学自然科学学报,2003,26(2):88-92
60.庞丽琴,付宝春,康红梅,赵玉良,陈晓滨.瓜类植物花粉形态扫描电镜观察.山西农业科学,2006,34(4):39-41
61.彭华胜,王德群.4种苍术属药用植物叶表皮显微研究.现代中药研究与实践,2006,20(1):28-31
62.祁正兴,印家健,李梦龙.聚类分析在植物分子遗传特性研究中的应用.攀枝花学院学报,2006,23(3):114-118
63.干春录.药用植物括楼种质资源及多样性研究.[硕士学位论文].浙江:浙江大学,2007
64.曲波,翟强,许玉凤,范海延,陈伟之.4种忍冬属植物花粉的形态比较.沈阳农业大学学报,2006,37(1):96-98
65.单成钢,王志芬,苏学合,闫树林。桔梗种质资源农艺性状的主成分及聚类分析.现代中药研究与实践,2008,22(1):25-29
66.邵邻相,张凤娟.6种松科植物叶表皮的扫描电镜观察.植物研究,2005,25(3):281-286
67.司曼星.黄瓜种质资源遗传多样性及亲缘关系分析.[硕士学位论文].上海:上海交通大学,2006
68.宋振巧,王洪刚,王建华.栝楼的研究进展.山东农业科学,2005,5:72-76
69.孙继,叶利勇,陶月良.芜菁种质资源形态性状的多样性分析.浙江农业科学,2007,3:248-252
70.孙体健,王浩江,李秀花,黄文.栝楼黄色素的提取及性能研究.中国食品卫生杂志,2005,17(3):228-230
71.孙稚颖,周凤琴,郭庆梅.山东产不同农家品种瓜蒌的种子蛋白电泳分析.时珍国医国药,2005,16(12):1224-1225
72.孙稚颖,李恩波,周凤琴.山东农家栽培瓜蒌品种的同工酶研究.中药材,2005,28(10):863-865
73.陶宛鑫,濮绍京,金文林,赵波,万平.野生小豆种质资源植株形态多样性分析.植物遗传资源学报,2007,8(2):174-178
74.唐丽,刘友全,钟秋平.湖南南天竹13个种质资源酯酶同工酶研究.江西农业大学学报,2007,29(6):970-975
75.唐自慧,逄云莉,何兴金,刘海艳.鹿药属植物叶表皮特征及其系统学意义.武汉植物学研究,2007,25(6):550-557
76.王国荣,吴府胜.果树种质资源研究及孢粉学应用研究进展.山东林业科技,2007,4:84-87
77.王海东,杨立新.李品种可溶性蛋白质电泳研究.辽宁林业科技,2004,3:20-22
78.王开发,王宪曾.孢粉学概论.北京:北京大学出版社.1983.23、32
79.王良信.实用中药材田间试验手册.中国医药科技出版社,2003
80.王敏,黄璐琦,付桂芳.栝楼3个农家品种间亲缘近似关系的RAPD分析.中国中药杂志,1999,24(6):336-338
81.王宁.天花粉的本草考证.中医文献杂志,2006,3:19-23
82.王述民,谭富娟,胡家蓬.小豆种质资源同工酶遗传多样性分析与评价.中国农业科学,2002,35(11):1311-1318
83.王伟,赵南先.天南星科叶表皮研究.武汉植物学研究,2002,20(5):343-349
84.王文莉,赵兰勇,朱西存,时鑫.花卉孢粉学研究进展.山东林业科技,2002,5:36-39
85.王玉国,李光照,张文驹,尤佳,陈家宽.中国杜鹃花属的叶表皮特征及其系统学意义.植物分类学报,2007,45(1):1-20
86.王志坤.黄瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].哈尔滨:东北农业大学,2004
87.魏瑜.RAPD技术在中药材道地性鉴定中的应用.海峡药学,2008,20(10):148-151
88.吴祝华,施季森,席梦利,刘光欣.百合种质资源花粉形态及亲缘关系研究.浙江林学院学报 2007,24(4):406-412
89.夏军辉.丝瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2007
90.夏幽泉,幸亨泰.箭笞豌豆2个品种的蛋白质电泳分析.云南大学学报(自然科学版),2005,25:115-120
91.徐如松.安徽皇甫山五种黄精属植物叶表皮气孔研究.安徽农业技术师范学院学报,2001,15(2):31-32
92.宣继萍,周志芳,刘建秀,郭爱桂.结缕草属植物物候期的差异分析.植物资源与环境学报,2008,17(3):53-57
93.严一字.桔梗种质资源及种子生物学特性研究.[硕士学位论文].哈尔滨:东北林业大学,2007
94.杨成生,王芳,张亚军,姜成英.10个杨树品种的物候期研究.甘肃林业科技,2005,30(2):29-33
95.杨德奎,马成涛,宋艳梅.葫芦科8属11种植物花粉形态的扫描电镜观察.广西植物,2008,28(2):148-153
96.杨丽华,黄璜,陈灿,罗海峰.湖南省三种野生鱼腥草气孔显微观察.作物研究,2006,3:243-245
97.袁涛,王莲英.几个牡丹野生种的花粉形态及其演化、分类的探讨.北京林业大学学报.1999,21(1):17-22
98.袁涛,王莲英.根据花粉形态探讨中国栽培牡丹的起源.北京林业大学学报.2002,24(1):5-15
99.赵文飞.银杏雄株开花生物学特性研究.[硕士学位论文].山东:山东农业大学,2004
100.赵杨,骈瑞琪,陈晓阳,王秀荣.二色胡枝子种子储藏蛋白多样性研究.西北植物学报,2007,27(9):1767-1771
101.张汉尧,刘小珍,孙茂胜,杨宇明.竹子形态标记聚类分析研究.竹子研究汇刊,2005,24(1):25-29
102.章丽平,周白玮.同工酶与植物亲缘关系.云南农业大学学报,2006,21(4):531-534
103.张丽娜,雷家军,韩凌,胡新颖.百合属(Lilium)几种植物花粉形态的观察。西北农业学报,2006,15(6):174-178
104.张鹏,张海洋,郑永战,郭旺珍,魏利斌,张天真.芝麻种质资源因子分析及聚类分析.中国油料作物学报,2008,30(1):71-78 2005,23(2):6-10
106.张西丽,周厚高,周焱,宁云芬.几个百合品种花粉电镜观察及其亲缘关系分析.广西农业生物科学,2000,19(3):175-180
107.张秀英,王雁.桃花种质资源花粉形态的比较与观察.北京林业大学学报,1997,19(2):57-62
108.张玉霞,张习敏,黄武桂花属植物花粉粒及叶片气孔器形态的扫描电镜观察比较研究.贵州师范大学学报(自然科学版),2006,24(4):11-16
109.张贞,王艳莉,肖庆业,丁思统.栓皮栎物候期统计分析.江西林业科技,2006,5:39-40
110.郑玉红,刘建秀,陈树元.我国狗牙根种质资源多样性分析--Ⅰ.同工酶分析.中国草地,2003,25(5):52-58
111.褚盼盼.中国南瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学,2007
112.周兰英,王永清,张丽.26种杜鹃属植物花粉形态及分类学研究.林业科学,2008,44(2):55-64
113.周守标,王影,李金花,王春景,余本祺.安徽贝母属植物的叶表皮形态研究.中国中药杂志,2007,32(2):105-110
114.周元.天麻生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2005
115.周以飞,高毅,潘大仁,陈观水,张绪璋.果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析.中国农学通报,2007,23(5):409-416
116.Caselas Pet al.Trichokirin,a ribosome inactivating protein from the seeds of Trichosanthes kirilowii Maximowicz:Purification,partial characterization and use for preparation of immunotoxins.EurJBiochem,1988,176:581-588
117.Chang-Ming Dou,Ji-Cheng Li.Efect of extracts of trichosanthes root tubers on HepA-H cells and HeLa cells.World J Gastroenterol 2004,10(14):2091-2094
118.Pang-Chui Shaw,Ka-Ming Leeb,Kam-Bo Wong.Recent advances in trichosanthin,a ribosome -inactivating protein with multiple pharmacological properties.Toxicon 2005,45:683-689
119.Pushpa Narayanan,Nai Ki Mak,Phuong Bich Luong,Ricky Ngok Shun Wong.Isolation and characterization of new isoforms of trichosanthin from Trichosanthes kirilowii.Plant Science 2002,162:79-85
120.Shao-hua Shu,Guo-zhen Xie,Xiao-liang Guo,Mo Wang.Purification and characterization of a novel ribosome-inactivating protein form seeds of Trichosanthes kirilowii Maxim.Protein Expression and Purification,2009
2.安巍,赵建华,石志刚,焦恩宁.枸杞种质资源果实数量性状评价指标探讨.果树学报,2007,24(2):172-175
3.白晓雷.二年生沙芥物候期观察及不同生育期营养成分分析.[硕士学位论文].内蒙古:内蒙古农业大学.2007
4.蔡宝炎.32份中国南瓜种质资源的遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2006
5.蔡健,兰伟,罗瑞丽,李飞天,闻峰.皖北小麦主栽品种遗传多样性的系统聚类法分析.中国农学通报,2006,22(11):143-147
6.蔡秀珍,刘克明,丛义艳,陈薇.风仙花属(Impatiens L.)10种植物花粉形态的扫描电镜观察.植物研究,2007,27(3):279-283
7.蔡永敏,侯惠鸣.天花粉名称考释.陕西中医,2003,24(5):457-458
8.陈诚.栝楼、附子、决明、白花蛇草高校栽培技术.河南科学技术出版社,2004:13-14
9.陈存武,李耀亭,周守标.大别山5种黄精属植物叶表皮的初步比较研究.安徽农业大学学报,2006,33(1):108-112
10.陈惠明,周长久.萝卜酯酶同工酶与品种亲缘关系的研究.湖南农业大学学报,1999,25(3):191-194
11.陈亮,童启庆.山茶属8种1变种变种形态比较.茶叶科学,1997,17(2):183-188
12.陈沁滨,侯喜林,张波,杨金明,冷月强,蒋芳玲.洋葱种质资源数量性状的主成分分析和聚类分析.江苏农业学报,2007,23(4):376-378
13.陈四龙,李玉荣,程增书,徐桂真.花生品种(系)生物学性状的主成分分析和聚类分析.花生学报,2007,36(2):28-34
14.邓小燕,周颂东,何兴金.中国黄精属13种植物花粉形态及系统学研究.武汉植物学研究,2007,25(1):11-18
15.董诚明,苏秀红,李增光,程书辉.两种冬凌草种子的生物学特性及蛋白质电泳的比较研究.河南科学,2008,26(1):39-42
16.董婷霞,徐国均,金蓉鸾,徐珞珊.栝楼属种子类药材的蛋白电泳鉴别.中国药科大学学报.1990,21(4):249-250
17.杜娟.不同居群半夏综合性状的比较研究.[硕士学位论文].北京:首都师范大学,2006
18.段琦梅.黄芪生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2005
19.樊建峰,李绍稳,朱立武,等.红籽瓜数量性状的主成分与聚类分析.中国农学通报,2006,22(2):301-304
20.方从兵.我国果树孢粉学研究进展.安徽农业大学学报,2002,29(2):154-157
21.郭法杰.瓜蒌属药用植物研究概述.中医药临床杂志,2007,19(4):419-412
22.郭贵敏.21个花生地方品种的数量性状分析和聚类分析.花生学报,2004,33(3):29-31
23.郭军.西瓜种质资源的遗传亲缘关系与品种的分子鉴定研究.[硕士学位论文].杭州:浙江大学.2001
24.郭丽秀,卫兆芬.国产省藤属植物的叶表皮形态学.热带亚热带植物学报,2005,13(4):277-284
25.郭巧生,王庆亚,史红专.半夏种内不同居群花粉粒形态比较研究.中国中药杂志,2006,31(1):27-31
26.郭庆海,王康才,唐晓清.不同栽培居群菘蓝花粉的扫描电镜观察.中国中药杂志,2008,33(11):1322-1325
27.郭庆梅,周凤琴,李定格,张永清.瓜萎的名称、原植物和产地的本草考证,中医研究,2006,19(3):28-29
28.郭庆梅,周凤琴,杨金玲,高慧.山东栽培瓜蒌果皮超微形态的初步研究.中国中药杂志,2005,30(20):1580-1582
29.郭庆梅,周凤琴,张卉,张永清.瓜蒌的药用部位、采收加工和功效的考证.中医药学刊,2006,24(10):1824-1827
30.何和明.石榴种内不同居群酯酶同工酶酶谱特征分析.海南师范学院学报(自然科学版),2006,19(3):269-273
31.胡玉涛,王沫,肖平阔.应用栝楼进行郊区绿化的探讨.中国林副特产,2006,10(5):81-83
32.胡志昂,王洪新.蛋白质多样性和品种鉴定.植物学报,1991,33(7):556-564.
33.黄璐琦,乐崇熙,杨滨.栝楼属药用植物资源调查.中国中药杂志,1995,20(4):195-198
34.黄璐琦,乐崇熙,杨滨.栝楼属(Trichosanthes L.)的系统学研究.江西中医学院学报,1999,11(2):75-79
35.黄璐琦,乐崇熙,郑俊华,诚静容.栝楼属种皮的扫描电镜观察及其分类学意义.植物研究,1999,19(3):298-301
36.黄璐琦,杨滨,乐崇熙,诚静容.栝楼属花粉形态研究及其在分类学上的意义.植物分类学报,1997,35(2):125-135
37.黄璐琦,乐崇熙,李懋学.栝楼属8种植物的染色体数目.云南植物研究,1994,16(1):95-96
38.黄璐琦,王敏,杨滨.栝楼农家品种苗期的分子标识鉴别.中国药学杂志,1999,34(9):642
39.金凤媚,薛俊,郏艳红,刘仲齐.番茄遗传资源的聚类分析研究.华北农学报,2006,21(6):49-54
40.孔秋生.萝卜种质资源遗传多样性和亲缘关系研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2003
41.蓝盛银,徐珍秀.植物花粉剥离观察扫描电镜图解.北京:科学出版社,1996,47-48
42.乐崇熙,冯学锋,黄璐琦.18种瓜萎皮组织学研究.中国中药杂志,1999,24(11):646-710
43.乐崇熙,黄璐琦,殷晓杰.18种瓜蒌皮的形态学研究.中国中药杂志,1999,24(7):396-397
44.雷泞菲,苏智先,陈劲松.同工酶技术在植物研究中的应用[J].四川师范学院学报(自然科学版),2000,21(4):321-325.
45.李爱花,管开云,王仲朗.斑龙芋属(天南星科)及近缘属植物的叶表皮形态.云南植物研究,2005,27(6):629-638
46.李先恩,祁建军,周丽莉,杨世林.地黄种质资源形态及生物学性状的观察与比较.植物遗传资源学报,2007,8(1):95-98
47.李晓红,潘超,尹莉娟,邵剑文,张小平.濒危植物黄山梅及其相关植物的叶表皮特征研究.安徽师范大学学报(自然科学版),2005,28(3):329-332
48.黎茵,黄上志,傅家瑞.不同品种花生种子蛋白质的电泳分析.植物学报,1998,40(6):534-541
49.刘昌文,丁志祥,程昌文.柑橘属叶片酯酶同工酶和蛋白质电泳分析.西南农业学报.1997,10(4):70-75
50.刘剑锋,柳福柱,程云清,程军.5种秋子梨品种的花粉形态观察.西北农林科技大学学报(自然科学版),2006,34(5):153-157
51.刘文婷.丹参的生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2004
52.刘晓虹,宋勇,陈惠明.黄瓜种质资源亲缘关系的聚类分析.湖南农业科学,2001,6:9-11
53.刘晓梅,潘建平,曾杨,林志雄,匡石滋,田世尧,姜玲.黄皮种质资源的RAPD分析.广东农业科学,2007,2:13-16
54.林新春,俞志雄.9种木兰科植物的花粉形态观察.浙江林学院学报,2003,20(4):353-356
55.陆嘉惠,李学禹,周玲玲,吴玲.甘草属植物叶表皮特征及其系统学意义.云南植物研究,2005,27(5):525-533
56.梅莉娟.中国郁金香属植物物候特征及居群形态分化.[硕士学位论文].新疆:新疆农业大学,2006
57.宁志怨,董玲,陈静娴,廖华俊,江芹,孙涌潮.栝楼种质资源亲缘关系的RAPD分析.安徽农业大学学报,2007,34(4):560-563
58.潘建国.试论应用孢粉学及其新进展.微体古生物学报,2006,19(2):206-214
59.潘月红,刘克明,雷立公.菖蒲属和天南星科5属植物叶表皮的比较.湖南师范大学自然科学学报,2003,26(2):88-92
60.庞丽琴,付宝春,康红梅,赵玉良,陈晓滨.瓜类植物花粉形态扫描电镜观察.山西农业科学,2006,34(4):39-41
61.彭华胜,王德群.4种苍术属药用植物叶表皮显微研究.现代中药研究与实践,2006,20(1):28-31
62.祁正兴,印家健,李梦龙.聚类分析在植物分子遗传特性研究中的应用.攀枝花学院学报,2006,23(3):114-118
63.干春录.药用植物括楼种质资源及多样性研究.[硕士学位论文].浙江:浙江大学,2007
64.曲波,翟强,许玉凤,范海延,陈伟之.4种忍冬属植物花粉的形态比较.沈阳农业大学学报,2006,37(1):96-98
65.单成钢,王志芬,苏学合,闫树林。桔梗种质资源农艺性状的主成分及聚类分析.现代中药研究与实践,2008,22(1):25-29
66.邵邻相,张凤娟.6种松科植物叶表皮的扫描电镜观察.植物研究,2005,25(3):281-286
67.司曼星.黄瓜种质资源遗传多样性及亲缘关系分析.[硕士学位论文].上海:上海交通大学,2006
68.宋振巧,王洪刚,王建华.栝楼的研究进展.山东农业科学,2005,5:72-76
69.孙继,叶利勇,陶月良.芜菁种质资源形态性状的多样性分析.浙江农业科学,2007,3:248-252
70.孙体健,王浩江,李秀花,黄文.栝楼黄色素的提取及性能研究.中国食品卫生杂志,2005,17(3):228-230
71.孙稚颖,周凤琴,郭庆梅.山东产不同农家品种瓜蒌的种子蛋白电泳分析.时珍国医国药,2005,16(12):1224-1225
72.孙稚颖,李恩波,周凤琴.山东农家栽培瓜蒌品种的同工酶研究.中药材,2005,28(10):863-865
73.陶宛鑫,濮绍京,金文林,赵波,万平.野生小豆种质资源植株形态多样性分析.植物遗传资源学报,2007,8(2):174-178
74.唐丽,刘友全,钟秋平.湖南南天竹13个种质资源酯酶同工酶研究.江西农业大学学报,2007,29(6):970-975
75.唐自慧,逄云莉,何兴金,刘海艳.鹿药属植物叶表皮特征及其系统学意义.武汉植物学研究,2007,25(6):550-557
76.王国荣,吴府胜.果树种质资源研究及孢粉学应用研究进展.山东林业科技,2007,4:84-87
77.王海东,杨立新.李品种可溶性蛋白质电泳研究.辽宁林业科技,2004,3:20-22
78.王开发,王宪曾.孢粉学概论.北京:北京大学出版社.1983.23、32
79.王良信.实用中药材田间试验手册.中国医药科技出版社,2003
80.王敏,黄璐琦,付桂芳.栝楼3个农家品种间亲缘近似关系的RAPD分析.中国中药杂志,1999,24(6):336-338
81.王宁.天花粉的本草考证.中医文献杂志,2006,3:19-23
82.王述民,谭富娟,胡家蓬.小豆种质资源同工酶遗传多样性分析与评价.中国农业科学,2002,35(11):1311-1318
83.王伟,赵南先.天南星科叶表皮研究.武汉植物学研究,2002,20(5):343-349
84.王文莉,赵兰勇,朱西存,时鑫.花卉孢粉学研究进展.山东林业科技,2002,5:36-39
85.王玉国,李光照,张文驹,尤佳,陈家宽.中国杜鹃花属的叶表皮特征及其系统学意义.植物分类学报,2007,45(1):1-20
86.王志坤.黄瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].哈尔滨:东北农业大学,2004
87.魏瑜.RAPD技术在中药材道地性鉴定中的应用.海峡药学,2008,20(10):148-151
88.吴祝华,施季森,席梦利,刘光欣.百合种质资源花粉形态及亲缘关系研究.浙江林学院学报 2007,24(4):406-412
89.夏军辉.丝瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学.2007
90.夏幽泉,幸亨泰.箭笞豌豆2个品种的蛋白质电泳分析.云南大学学报(自然科学版),2005,25:115-120
91.徐如松.安徽皇甫山五种黄精属植物叶表皮气孔研究.安徽农业技术师范学院学报,2001,15(2):31-32
92.宣继萍,周志芳,刘建秀,郭爱桂.结缕草属植物物候期的差异分析.植物资源与环境学报,2008,17(3):53-57
93.严一字.桔梗种质资源及种子生物学特性研究.[硕士学位论文].哈尔滨:东北林业大学,2007
94.杨成生,王芳,张亚军,姜成英.10个杨树品种的物候期研究.甘肃林业科技,2005,30(2):29-33
95.杨德奎,马成涛,宋艳梅.葫芦科8属11种植物花粉形态的扫描电镜观察.广西植物,2008,28(2):148-153
96.杨丽华,黄璜,陈灿,罗海峰.湖南省三种野生鱼腥草气孔显微观察.作物研究,2006,3:243-245
97.袁涛,王莲英.几个牡丹野生种的花粉形态及其演化、分类的探讨.北京林业大学学报.1999,21(1):17-22
98.袁涛,王莲英.根据花粉形态探讨中国栽培牡丹的起源.北京林业大学学报.2002,24(1):5-15
99.赵文飞.银杏雄株开花生物学特性研究.[硕士学位论文].山东:山东农业大学,2004
100.赵杨,骈瑞琪,陈晓阳,王秀荣.二色胡枝子种子储藏蛋白多样性研究.西北植物学报,2007,27(9):1767-1771
101.张汉尧,刘小珍,孙茂胜,杨宇明.竹子形态标记聚类分析研究.竹子研究汇刊,2005,24(1):25-29
102.章丽平,周白玮.同工酶与植物亲缘关系.云南农业大学学报,2006,21(4):531-534
103.张丽娜,雷家军,韩凌,胡新颖.百合属(Lilium)几种植物花粉形态的观察。西北农业学报,2006,15(6):174-178
104.张鹏,张海洋,郑永战,郭旺珍,魏利斌,张天真.芝麻种质资源因子分析及聚类分析.中国油料作物学报,2008,30(1):71-78 2005,23(2):6-10
106.张西丽,周厚高,周焱,宁云芬.几个百合品种花粉电镜观察及其亲缘关系分析.广西农业生物科学,2000,19(3):175-180
107.张秀英,王雁.桃花种质资源花粉形态的比较与观察.北京林业大学学报,1997,19(2):57-62
108.张玉霞,张习敏,黄武桂花属植物花粉粒及叶片气孔器形态的扫描电镜观察比较研究.贵州师范大学学报(自然科学版),2006,24(4):11-16
109.张贞,王艳莉,肖庆业,丁思统.栓皮栎物候期统计分析.江西林业科技,2006,5:39-40
110.郑玉红,刘建秀,陈树元.我国狗牙根种质资源多样性分析--Ⅰ.同工酶分析.中国草地,2003,25(5):52-58
111.褚盼盼.中国南瓜种质资源遗传多样性研究.[硕士学位论文].武汉:华中农业大学,2007
112.周兰英,王永清,张丽.26种杜鹃属植物花粉形态及分类学研究.林业科学,2008,44(2):55-64
113.周守标,王影,李金花,王春景,余本祺.安徽贝母属植物的叶表皮形态研究.中国中药杂志,2007,32(2):105-110
114.周元.天麻生物学特性研究.[硕士学位论文].陕西:西北农林科技大学,2005
115.周以飞,高毅,潘大仁,陈观水,张绪璋.果蔗不同器官在不同生育期的同工酶聚类相关分析.中国农学通报,2007,23(5):409-416
116.Caselas Pet al.Trichokirin,a ribosome inactivating protein from the seeds of Trichosanthes kirilowii Maximowicz:Purification,partial characterization and use for preparation of immunotoxins.EurJBiochem,1988,176:581-588
117.Chang-Ming Dou,Ji-Cheng Li.Efect of extracts of trichosanthes root tubers on HepA-H cells and HeLa cells.World J Gastroenterol 2004,10(14):2091-2094
118.Pang-Chui Shaw,Ka-Ming Leeb,Kam-Bo Wong.Recent advances in trichosanthin,a ribosome -inactivating protein with multiple pharmacological properties.Toxicon 2005,45:683-689
119.Pushpa Narayanan,Nai Ki Mak,Phuong Bich Luong,Ricky Ngok Shun Wong.Isolation and characterization of new isoforms of trichosanthin from Trichosanthes kirilowii.Plant Science 2002,162:79-85
120.Shao-hua Shu,Guo-zhen Xie,Xiao-liang Guo,Mo Wang.Purification and characterization of a novel ribosome-inactivating protein form seeds of Trichosanthes kirilowii Maxim.Protein Expression and Purification,2009
© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号 地址：北京市海淀区学院路29号 邮编：100083 电话：办公室：(+86 10)66554848；文献借阅、咨询服务、科技查新：66554700 |