用户名: 密码: 验证码:
中药抗新城疫病毒活性成分的筛选研究
详细信息    本馆镜像全文|  推荐本文 |  |   获取CNKI官网全文
摘要
新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)严重危害了各国养禽业的发展。目前国内外均采用疫苗免疫接种进行预防,尚无有效的治疗方法,而中药在新城疫的防治上越来越受到人们的重视,并取得了显著的科技成果。
     本研究选取临床上常用的抗病毒中药成分氧化苦参碱(oxymatrine, OM)、甘草酸(glycyrrhizic acid, GA)、绿原酸(chlorogenic acid, CA)、栀子苷(geniposide, GP)、虎杖苷(polydatin, PD)、木犀草素(luteolin, LT)、芦丁(rutin, RT)、黄芪多糖(astragalus polysaccharide, APS)作为研究对象,采用细胞培养法体外分两次筛选抗病毒活性的中药单体和复方成分,通过动物实验验证体外的筛选结果。体外初筛出了四种单体和四种复方,其抗毒活性依次为OM>APS>GA>GP;方1(OM+APS)>方3(OM+APS+GP)>方2(APS+GA)>方4(APS+GA+GP);复筛出两种单体和两种复方,其抗毒活性依次为OM>APS;方1(OM+APS)>方3( OM+APS+GP )。动物实验表明单体OM对NDV有显著的预防作用,而复方1则有显著的治疗作用,与攻毒对照比较,实验组表现为雏鸡死亡率低、器官病变轻微、增重较显著。为寻找优质的抗NDV活性物质和研制新的防治ND中药制剂提供了理论依据,对ND的临床防治具有重要意义。
Newcastle disease virus (NDV) seriously damaged to the poultry industry developing all over the world. At present, the most effective control method is vaccination for prevention.In this test, a few of antiviral Chinese traditional medicines were selected, such as Oxymatrine (Oxymatrine, OM),Glycyrrhizin (glycyrrhizic acid, GA),Chlorogenic acid (chlorogenic acid, CA), Geniposide(geniposide, GP), Polydatin (polydatin, PD), Luteolin (luteolin, LT),Rutin (RT) and Astragalu polysaccharide (Astragalus polysaccharide, APS). Screening of monomer and compound which had inhibitivity active to NDV in vitro and in vivo.The antiviral activity of four monomers and recipes showed as follow:OM>APS>GA >GP;recipe1(OM+APS)>recipe3(OM+APS+GP)>recipe2(GA+AP )>recipe4(GA+APS+GP) at former screening, and OM>APS;recipe1(OM+APS)>recipe3 (OM+APS+GP) at aga- in screening in vitro.The animal results showed that OM had significant prevention for ND,however, recipe1 had significants treatment for ND. The group of exprements showed that a higher protection ratio, less organ lesions and more remarkable enhancing in weight compared with group of virals control. It would be able to provide a therorational basis for new Chinese medicine reagents, as well as those drug for clinical prevention and treatment of NDV innovation.
引文
[1] 冯本华, 马萍, 徐艳, 等.中药抗病毒感染的研究近况[J].现代中西医结合杂志, 2005, 14(15): 2073-2074.
    [2] 张晓菊, 麻延峰, 王艳红.浅论中药抗流感病毒研究概况[J].中兽医医药杂志, 2005, 3: 27
    [3] 刘福强, 王卫东, 汤真.抗病毒中药的研究进展[J].医药导报, 2004, 23(8): 536-537.
    [4] 张其威, 张楚瑜.抗病毒中药研究的最新进展[J].中成药, 2005, 27(1): 116-119.
    [5] 潘惠娟, 宋涛.黄芪多糖对抗环磷酰胺免疫抑制作用的试验研究[J].细胞与分子免疫学杂志, 1997, 13(增刊): 54
    [6] 胡元亮, 孔祥峰, 张宝康, 等.10 种中药成分对鸡胚成纤维细胞生长的影响[J]. 中国兽医学报, 2003, 23(6): 601-603.
    [7] 傅谧亚. 中药抗病毒临床实验研究概况[J]. 天津中药学院报, 2002, 21(2): 49-50.
    [8] 石效平, 张知新. 小儿病毒性心肌炎的中医治疗[J]. 中国全科医学, 2002, 5(7): 523.
    [9] 王振纲. 黄芪的免疫药理学研究. 中国药理与临床研究进展. 第一册: 254-261.
    [10] 贺玉琢. 甘草的成分研究[J]. 国外医学中医中药分册, 1995, 17(4): 36-37.
    [11] 李铁民, 梁再斌. 甘草提取物及其衍生物的抗病毒研究进展[J]. 中草药, 1994, 25(12): 655-657.
    [12] Ito M,et al. Antiviral Res,1987,7:127.
    [13] Chen F, KH Jiang Y, et al.In vitro susceptibility of 10 clinical isolates of SARS coronavirus to selected antiviral compounds[J].J Clin Virol, 2004, 31(1): 69-75.
    [14] Cinatl J, Morgenstern B, Bauer G, et al.an active component of liquorice roots,and replication of SARS- associated coronavirus[J].Lancet, 2003, 361: 2045-2046.
    [15] Baba M, et al. Antiviral Res,1987,7(2):99..
    [16] 白木公康. 甘草甜素抗乙型肝炎病毒作用的阐释, 和汉医学杂志, 1995, 12(1): 24.
    [17] 田树辙.肝脏, 1991, 32(11): 990.
    [18] 苗抗丽, 张建中, 懂颖, 等. 苦参的化学成分及药理的研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2001, 13(2): 69-73.
    [19] 李正蓉. 苦参素的药理与临床进展[J]. 华西药学杂志, 2003, 18(6): 435-437.
    [20] 王国俊, 蔡雄, 王俊学, 等. 苦参素(氧化苦参碱)治疗慢性肝炎的基础与临床[J]. 第二军医大学学报, 1999, 20(7):445.
    [21] 陈萦垣, 李继强, 曾民德, 等. 氧化苦参碱抗丙型肝炎病毒的体外实验研究[J]. 中华肝脏病杂志, 2001, 9(增刊): 12-14.
    [22] 刘小雷, 宿瑞俊, 贾秀珍, 等. 氧化苦参碱体外抗病毒性心肌炎试验研究[J]. 中国分子心脏病学杂志, 2003, 3(3): 135-139.
    [23] 国家中医药管理局《中华本草》编辑委员会. 中华本草[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1999.
    [24] 李丽静, 王继彦, 王岩, 等. 返魂草提取物及其有效成分抗病毒作用的研究[J]. 中国中医基础医学杂志, 2005, 11(8): 585-587.
    [25] 胡克杰, 孙考祥, 王璟璐, 等. 绿原酸体外抗病毒作用研究[J]. 哈尔滨医科大学学报, 2001, 35(6): 430-431.
    [26] Y. Lee L R Howard and B. Villabn Flavonoids and Autioxidant Activityof Fresh Pepper (Capsicun-annuum)Cultivars [J]. Journal of Science, 1995, 60(3):483-476.
    [27] 龚国清, 龚国华, 钱之玉, 等. 木樨草素对猪传染性胃肠炎病毒的抑制作用[J]. 中国药科大学学报, 2005, 36(5), 453-456.
    [28] 何丽娜, 何素冰, 杨军. 木樨草素体外抗柯萨奇 B3 病毒的作用[J]. 中国现代应用药学杂志, 2000, 17(5): 362-365.
    [29] Wlekik M,Luczak M,Panasiak W,et al. Structural basis for antiviral activityof flavonoidsnaturally occurring compounds[J]. Acta Virol,1988,32(6):522-525.
    [30] Vrijsen R,Everaert L,Boeye A. Antiviral activity of flavones and potentiation by ascorbate[J]. Gen Virol,1988,69(7): 1749-1751.
    [31] Tewtrakul S,Miyashiro H,Nakamura N,et al. HIV-I integrase inhibitory substances from Coleus parvifolius[J]. phytother Res,2003,17(3): 232-239.
    [32] 那莎, 郭国田, 王宗殿, 等. 栀子及其有效成分药理研究进展[J]. 中国中医药信息杂志, 2005, 12(1): 91.
    [33] 侯家玉. 中药药理学[M]. 北京: 中国中医药出版社, 2002, 163.
    [34] 王意忠, 崔晓兰, 高英杰, 等. 栀子提取物抗病毒试验研究[J]. 中国中药杂志, 2006, 31(14): 1176-1178.
    [35] 高守红, 杨少麟, 范国荣. 虎杖苷的研究进展[J]. 药学实践杂志, 2005, 23(3): 145. .
    [36] 国家医药管理局中药情报中心站 植物药有效成分手册[M]. 北京: 北京人民卫生出版社, 1986, 902.
    [37] 王艳芳, 王新华, 朱宇同, 等. 芦丁对甲型流感病毒抑制作用实验研究[J]. 中医药学刊, 2005, 5(23): 827.
    [38] 褚秀玲, 韦旭斌. 抗病毒中草药研究进展[J]. 中兽医学杂志, 2006, 1: 33-38.
    [39] 孙艳霞, 李秀萍, 郭范林, 等. 产蛋鸡新城疫抗体水平检测数据与分析[J].畜禽业, 2003, (8): 29.
    [40] B.W. 卡尔尼克主编.禽病学.第十版.高福, 苏敬良主编. 北京: 中国农业出版社, 1999.
    [41] 祝建新. 中兽医防治畜禽病毒性疾病的可能性及其途径探讨[J]. 中兽医医药杂志, 1994, 1: 16-18.
    [42] 史秋梅, 沈萍. 中草药在防治畜禽疾病中的作用[J]. 中国兽药杂志, 2004, 38(12): 38-41.
    [43] 李柠. 筛选抗病毒中草药的研究[J]. 中兽医医药杂志, 1988, 3: 6-9.
    [44] 王志玉, 许斌, 宋艳艳,等. 大黄乙醇提取物的体外抗新城疫病毒作用[J]. 山东医科大学报, 2002, 40(1): 26-28.
    [45] 葛冰, 卢向阳, 蒋红梅, 等. 石香藿挥发油体外抗病毒作用研究[J]. 中兽医医药杂志, 2005, 2: 3-5.
    [46] 王桂亭, 白嗥, 崔艳艳, 等. 无花果叶提取物抗新城疫病毒的实验研究[J]. 中国人兽共患病杂志, 2005, 21(8): 710-712.
    [47] 王学林, 刘文森, 王承宇. 五种中草药抗鸡新城疫病毒作用研究[J]. 中兽药药医药杂志, 2003, 5: 5-7.
    [48] 于海, 孙英峰, 郑丽艳, 等. 中药虎杖抗新城疫病毒的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2004, 10: 63-64.
    [49] 姜宗敏, 张秀英, 任艳红. 6 种中药在鸡胚中对新城疫病毒活性的影响[J]. 动物医学进展, 2005, 26(2): 98-100.
    [50] 史秋梅, 沈萍, 陈丽凤, 等. 筛选抗病毒中药的研究[J]. 中国动物保健, 2003, 9: 22-23.
    [51] 胡元亮, 孔祥锋, 李祥瑞,等. 10 种中药成分对 CEF 的增值和抵抗 NDV 感染的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2004, 35(3): 301-305.
    [52] 黄康泰. 常用中药成分与药理手册[M]. 中国医药科技出版,1997, 124-1728.
    [53] 王天益, 汪明月, 朱玲. 病理生理条件下官桂畏赤石脂的实验研究[J]. 中国兽医杂志, 1995, 2: 35-37.
    [54] 任慧英, 朱连勤, 李文立, 等. 中药制剂“瘟毒杀”对 IBDV、NDV、AIV 的抑制试验[J]. 中国兽药杂志, 2001, 35(5): 57-59.
    [55] 褚跃成. 中西药复方制剂防治鸡新城疫的效力试验[J]. 河北畜牧兽医, 2000, 5:15-16.
    [56] 杨玉成, 胡满, 赵占民, 等. 中药病毒克防治鸡病毒性疾病实验[J]. 中兽医学杂志, 1996, 1: 1-4.
    [57] 蒋文灿, 王天益, 刘军. “克瘟灵”防治鸡新城疫的疗效观察[J]. 中兽医医药杂志, 1997, 5: 10-11.
    [58] 刘文森, 王学林, 王承宇, 等. 抗鸡新城疫复方中药制剂药理作用与临床试验研究[J]. 吉林农业大学学报, 2001, 26(6): 680-683.
    [59] 李光辉, 陈立军, 高俊杰. 中草药预防鸡新城疫病毒感染的试验[J]. 内蒙古民族大学学报(自然科学版), 2004, 19(6): 655-656.
    [60] 杨希国, 张秀英. 中药口服液对人工感染新城疫防治效果观察[J]. 中国兽医杂志, 2006, 42(2): 41-42.
    [61] 魏振英. 克感败毒散治疗鸡非典型性新城疫试验[J]. 中国动物检疫, 2001, 18(11): 36-37.
    [62] 张宗敏, 徐立, 姜元海, 等. “瘟病灵”试验研究报告[J]. 中兽医学杂志, 2001, 1: 9-11.
    [63] 许小琴, 申青海, 韦旭斌. 中草药抗病毒实验药理学研究现状与展望[J]. 中兽医医药杂志, 2004, 4, 48-50.
    [64] Yaolan Li, Linda S.M.Ooil, Hua Wang, et al. Antiviral Activities of Medicinal Herbs Traditionally Used in Southern Mainland China [J]. Phytother Res,2004,18: 718;722.
    [65] 郑永唐.17 种植物蛋白质提取物的抗 HIV1 活性[J]. 中国病毒学, 1998, 13(4): 312-316.
    [66] 邬洪波, 李洪梅, 卢长安, 等. 双黄连分散片抗病毒作用实验研究[J]. 中国实验方剂学杂志, 2004, 10(3): 48-50.
    [67] 闻平, 何艳, 叶庆林, 等. 中性红比色法检测细胞增殖活性[J].镇江医学院报, 2000, 10(1): 161-163.
    [68] 高英杰, 贺玉琢, 沈鸿, 等. 中性红染料吸收法在抗病毒药物研究中的应用[J].中药药理与临床, 1998, 14(4): 45-47.
    [69] 刘媛媛, 杨占秋, 何静, 等. MTT 分析法、空斑减数法及 CPE 观察法评估药物体外抗病毒效果的比较与分析[J]. 武汉大学学报(医学版), 2005, 26(2): 199-202.
    [70] LiD H, Tian Z G, Zhang J, et al. The use of MTT assay for the rapid testing cytotoxicity of drugs against non-solid tumor cell [J]. Cancer, 1991, 10(3): 226.
    [71] Cory A H,Owen T C, Barltrop J A, et al. Use of an aqueous solubletetrazolium/formazan assay for cell growth assays in culture [J] . Cancer Commun, 1991, 3(7):207.
    [72] Khabar K S, al-Zoghaibi F, Dzimiri M, et al. MTS interferon assay: A simplified cellular dehydrogenase assay for interferon activity using a water-soluble tetrazolium salt. J Interferon Cytokine Res, 1996, 16(1):31.
    [73] 张均田. 现代药理实验方法[M]. 北京: 北京医科大学中国协和医科大学联合出版社, 1998, 1430-1449.
    [74] Zheng YT, Ben KL,Jin SW. Anti-HIV-I activity of trichobitacin, a novel ribosome-inactivating protein [J]. Acta Pharm Sin, 2000, 21:179-182.
    [75] Zheng YT,Ben KL,Jin SW. Alpha-momorcharin inhibits HIV-1 replication in acutely but not chronically infected T lymphoid cell. [J]. Acta Pharm Sin, 1999, 20: 239-243.
    [76] Mahmoon N. Cellular assays for antiviral drugs [A]. Karn J. HIV: Apractical approach[M]. Vol2. Oxford university press, 1995, 271-287.
    [77] Gunther S, Asper M,Christina R,et al. Application of real-time PCR for testing antiviral compounds against Lassa virus, SARS coronavirus and Ebola virus in vitro. Antiviral Res, 2004, 63(3): 209.
    [78] 徐叔云, 卞如濂, 陈修. 药理实验方法[M]. 北京: 人民卫生出版社, 1991: 1397-1416.
    [79] 黄欣. 对传统药物中抗病毒剂的筛选方法[J]. 国外医学中医中药分册, 1995, 17(5): 57-61
    [80] 左丽, 陈力, 唐晓敏, 等. 黄芪 A6 组分对流感病毒感染小鼠的防治作用[J]. 中国病毒学, 1997, 12(4):342-345.
    [81] Kobayashi M, Davi SM, Utsunomiya T, et al. Antiviral effect of gingyo-san, a traditional Chinese herbal medicine, on influenza A2 virus infection in mice[J].Am J Chin Med, 1999, 27(1): 53
    [82] Rice W G, Bader J P. Discovery and in vitro development of AIDS antiviral drugs as bio-pharmaccuticals [J]. Adv Pharmacol, 1995, 6: 389-438. .
    [83] 李琦涵, 姜莉. 病毒感染的分子生物学[M]. 北京: 化学工业出版社, 2004
    [84] Xia Dong. Effects of Granodenna polysaccharides on inane function innnce [J]. J Bei jingmed univ, 1989(21): 533-536.
    [85] Zheng Q Y. The immunological activities of Phytolaccaacinosa polysaccharides [J].Information Chin Phamacol Sci,1989,6:22-25.
    [86] Stein B S, et al. Cell, 1987, 49: 659.
    [87] Kawalsk M, et al. Science, 1987, 237: 1351.
    [88] 周靓, 蒙义文. 多糖及其衍生物抗病毒作用研究进展[J]. 应用与环境生物学报, 1997, 3(1): 82-90.
    [89] 王长云, 管华诗. 多糖抗病毒作用研究进展Ⅱ-硫酸多糖抗病毒作用[J]. 生物工程进展, 2000, 20(2): 3-7.
    [90] 侯治富, 王维忠, 杨绍娟. 抗病毒药物的研究现状[J]. 中国药事, 1994, 8(6): 374.
    [91] 王长云, 管华诗. 多糖抗病毒作用研究进展Ⅲ-卡拉胶及其抗病毒作用[J]. 生物工程进展, 2000, 20(3): 39-42.
    [92] 李双杰. 苦瓜素对柯萨奇 B3 病毒 DNA 复制抑制作用的研究[J]. 上海中医药杂志, 2001, 5: 45-46.
    [93] Lin P Y. hmnop hamacologic activity of arterisin in Qinghaosu Aisapacific J Phamacol, 1988, 3: 197-200.
    [94] Lin P Y. The effect of artesunate on immune function in mice Reporte at the 5th southeast Asian and westem Pacific Regional meeting of phamaeologists Beijing 1988,48-52
    [95] 许建琴, 刘凤华. 21 世纪我国中兽药发展前景[J]. 中国禽业导刊, 2004, 21(18): 10-13.
    [96] 殷震, 刘景华主编. 动物病毒学[M]. 第二版. 北京: 科学出版社, 1997.
    [97] Kruse PF, Patterson MK, Tissue culture; methods and applications New York and London: Academic press, 1973,527.
    [98] 李凡, 易世红, 赵春艳等. 双黄连粉针剂抗病毒作用[J]. 中草药, 2002, 33(1): 52-54.
    [99] Witvrouw M, De Clercq E. Sulfated polysaccharides extracted from sea algae as potentialantiviral drugs[J]. General Pharmacology, 1997, 29: 497-495.
    [100] Furman PA, Wilson JE, Reardon JE. The Effect of Absolute Configuration on the Anti-HIV and Anti-HIV Activity of Nucleoside analogues [J].Antiviral Chem. Chemother,1995,6:345-355.
    [101]王薇, 杨占秋, 钟琼等. 大黄茶抗柯萨奇病毒 B3(CVB3)的实验研究[J]. 中医药学报, 2005, 83(4): 17-18.

© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号

地址:北京市海淀区学院路29号 邮编:100083

电话:办公室:(+86 10)66554848;文献借阅、咨询服务、科技查新:66554700