鸡胚发育过程中DNA甲基化水平变化规律
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摘要
本试验旨在研究鸡胚发育过程中基因组与特异基因DNA甲基化的变化模式。研究首先用改进的高效液相色谱法检测了鸡胚发育过程中基因组DNA甲基化的变化规律,然后用亚硫酸氢盐修饰后测序法测定了TNF-α和IGF2启动子区域和基因体的DNA甲基化变化规律,同时我们检测了DNA甲基转移酶(1、3A和3B)、TNF-α和IGF2在mRNA和蛋白水平的表达量。结果表明:1)鸡胚发育过程中心脏、肝脏和肌肉的基因组DNA甲基化水平呈现逐渐升高的规律,且胚胎发育后期肝脏的基因组DNA甲基化水平显著高于心脏和肌肉(P<0.05)。2)肌肉和肝脏中,TNF-α启动子区域的DNA甲基化水平呈现先升高后降低的规律;鸡胚发育第17天(E17)基因体的甲基化水平显著高于E8、E11和E14(P<0.05)。3)IGF2启动子区域甲基化水平持续降低而基因体甲基化水平逐渐升高。4)TNF-α在E17的mRNA和蛋白表达水平均高于其他三个胚龄(.P<0.05),而TNF-α在E8、E11和E14的表达水平无差异(P>0.05)。5)胚胎发育过程中IGF2的表达水平呈逐渐升高的规律。6)随着胚胎发育的进行,DNA甲基转移酶(1、3A和3B)均呈现逐渐升高的规律。由此可见,鸡胚发育过程中基因组DNA甲基化水平呈逐渐升高的规律,且与组织中各基因的表达水平密切相关;基因的表达同时受到启动子区域的去甲基化与基因体的高甲基化的调节。
引文