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鸡脾转移因子对蛋鸡肠上皮细胞紧密连接Occludin、Claudin表达的影响
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摘要
家禽的肠道是与外界环境接触表面积最大的器官,也是各种病原微生物侵入机体的主要门户。肠道紧密连接对于肠道黏膜屏障的完整性具有重要作用,它能够有效的阻挡毒性大分子及微生物穿过肠道黏膜屏障进入机体。本试验采用的鸡脾转移因子(Transfer Factor,TF)是利用SPF鸡的脾脏反复冻融、透析后获得的包含多肽及核苷酸的小分子物质,口服时不被消化,可从消化道吸收,是一种新型免疫制剂。利用TF(1mg/mL)灌服蛋鸡,自5日龄开始从饮水中加入TF,饲喂1周,停药1周,饲喂分为3个剂量组(分别为0.10 ml/只、0.25ml/只、1.00ml/只)及正常对照组。分别于12日龄、26日龄,取十二指肠、空肠、回肠、直肠。RT-PCR的方法检测各肠段紧密连接蛋白Claudin、Occludin mRNA的相对表达量的变化,探究鸡脾转移因子对鸡肠道紧密连接蛋白的影响。研究结果显示:连续使用鸡脾转移因子1周后即12日龄,十二指肠Claudin、Occludin mRNA相对表达量随着灌服剂量的增加有升高的趋势,而且1.00ml/只剂量组与对照组相比Claudin、Occludin分别显著升高81.80%(P=0.006)、14.89%(P=0.017)。在空肠,两种基因的相对表达量在各组之间差异都不显著。在回肠,与对照组相比Claudin mRNA相对表达量0.10ml/只剂量组显著增加44.19%(P=0.021),1.00ml/只剂量组显著增加46.61%(P=0.011)。在直肠,与对照组相比Claudin mRNA相对表达量1.00ml/只剂量组显著增加57.83%(P=0.004)。总体能够看出Claudin、Occludin mRNA相对表达量随着鸡脾转移因子的使用增加而有增加的趋势。停药1周,再用药1周至26日龄,与对照组相比,各剂量组Claudin、Occludin mRNA相对表达量均有显著升高,且随着灌服剂量的增加而增加的趋势比较显著。具体在十二指肠,与对照组相比,0.25ml/只剂量组Claudin、Occludin mRNA相对表达量分别显著增加65.10%(P=0.003)、40.14%(P=0.025),1.00ml/只剂量组分别显著增加81.04%(P=0.001)、72.92%(P=0.000)。在空肠,与对照组相比,1.00ml/只剂量组Claudin mRNA相对表达量显著增加75.42%(P=0.010),0.1ml/只剂量组Occludin mRNA相对表达量显著增加14.93%(P=0.033)。在回肠,与对照组相比,Claudin、Occludin mRNA相对表达量有明显的的增加,其中1.00ml/只组分别显著增加56.71%(P=0.010)、98.15%(P=0.000)。在直肠,与对照组相比,1.00ml/只剂量组Claudin相对表达量显著增加56.36%(P=0.008),0.25ml/只剂量组Occludin相对表达量显著增加51.26%(P=0.013)。结论:蛋鸡灌服鸡脾转移因子可有效提高肠道紧密连接蛋白Occludin、Claudin mRNA的相对表达量,且随灌服日龄的增加,作用效果更加显著。
引文

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