周期性机械牵张刺激对C2C12小鼠成肌细胞增殖和有氧代谢能力的影响
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摘要
研究目的:运动和力学负荷刺激在改善骨骼肌质量及代谢过程中发挥着重要作用,但鉴于实验技术和检测方法的滞后,关于细胞代谢的研究相对较少。本文使用细胞应力加载装置对C_2C_(12)小鼠成肌细胞施加不同频率的牵张应力,并通过特殊的细胞能量代谢设备对细胞外氧消耗水平进行检测,探讨不同频率牵张刺激对C_2C_(12)小鼠成肌细胞增殖及细胞有氧代谢能力的影响。研究方法:采用Flexercell细胞应力加载装置对体外培养的C_2C_(12)成肌细胞分别加载1、2Hz两种频率的牵张刺激,牵张幅度为15%,牵张时长为2h/d,连续进行4d。以静置培养的C_2C_(12)成肌细胞作为对照组。实验期间通过倒置相差显微镜观察细胞生长状态,利用CCK-8试剂盒测定细胞增殖情况。实验结束后,分别收取各组细胞,经胰酶消化处理后,利用荧光探针,通过能量代谢设备检测细胞耗氧量比率。研究结果:细胞经机械牵张刺激后,显微镜下细胞形态为典型的长梭形,排列呈现一定方向性,与牵张刺激方向平行,生长状况良好;与对照组细胞相比,1、2Hz频率的牵张刺激均可显著促进细胞增殖(P<0.05),且在第3、4d,1Hz实验组的增殖情况优于2Hz实验组;实验组与对照组细胞耗氧量比率均有增加,但各组之间并无显著差异(P>0.05)。研究结论:周期性机械牵张刺激能有效促进C_2C_(12)小鼠成肌细胞增殖,且与牵张刺激的频率有关,其中1Hz的牵张频率最佳,但牵张刺激对C_2C_(12)小鼠成肌细胞的有氧代谢能力无明显影响。
引文