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酶解石榴皮多酚与原石榴皮多酚的成分和抗氧化活性比较
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摘要
本试验对本课题组前期制备的酶解石榴皮多酚进行质谱分析和抗氧化性质分析,为石榴皮提取物作为新型饲料添加剂的开发和使用提供基础数据。成分鉴定采用液质联用(HPLC-MS)的方法进行检测,其中液相色谱条件为:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm);以0.1%甲酸溶液为流动相A,以0.1%甲酸乙腈为流动相B,进行线性梯度洗脱:0~10 min,3%~14%A;10~20 min,14%~40%A;20~43min,40%~100%A,流速为1 mL/min;柱温为20℃;检测波长为280 nm;进样量:10μL。质谱条件为,采用UPLC-Triple TOF 5600+飞行时间液质联用仪,选择负离子模式,扫描范围:m/z 100~1 500;雾化气(GS1):50psi;雾化气(GS2):50 psi;气帘气(CUR):30 psi;离子源温度(TEM):550℃;离子源电压(IS):-4 500 V;一级扫描:去簇电压:100 V;聚焦电压:10 V;二级扫描:采用IDA模式,CID能量为20、40和60 V。抗氧化活性的测定采用了四种方法,分别是DPPH自由基清除能力,铁离子还原能力(FRAP),超氧阴离子(O_2~(·-))清除能力,抑制脂质过氧化能力。(结果)结果显示,酶解后的石榴皮多酚在成分上与原石榴皮多酚有明显的区别。对较大的峰进行了分析,发现原石榴皮多酚有8个较大的峰,他们的出峰时间、荷质比和(或)可能化合物名称分别是:1)T=15.31,m/z(1 083.06),安石榴苷a。2)T=15.88,m/z(633.06),pedunculagin。3)T=17.38,m/z(1 083.06),安石榴苷b。4)T=20.92,m/z(757.09)。5)T=22.27,m/z(633.07),corilagin。6)T=23.15,m/z(301.00),鞣花酸异构体。7)T=30.41,m/z(301.00),鞣花酸。8)T=36.60,m/z(401.09),cetraric acid。酶解石榴皮多酚的成分种类变少,分子量变小,主要有4个大峰,分别是1)T=23.14,m/z(291.02),brevifolin carboxylic acid。2)T=25.68,m/z(600.99)。3)T=26.20,m/z(497.33),brevifolin。4)T=30.33,m/z(301.00),鞣花酸。体外抗氧化活性结果显示,DPPH清除率,FRAP值,超氧阴离子清除能力,脂质过氧化抑制能力均为原石榴皮多酚优于酶解后石榴皮多酚。以上结果表明,酶解石榴皮多酚中多酚种类比原石榴皮多酚减少,且大分子多酚消失,说明通过酶解作用多种大分子多酚降解为几种小分子多酚,而酶解后的石榴皮多酚体外抗氧化活性下降。
引文

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