Pim-3通过磷酸化STAT3促进黑色素瘤细胞的转移和侵袭
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- 论文作者：刘静 ; 曲新宇 ; 胡渊 ; 于馨 ; 兰培祥 ; 郭切 ; 韩秋菊 ; 张建 ; 张彩
- 年：2016
- 作者机构：山东大学;
- 论文关键词：黑色素瘤 ; Pim-3 ; STAT3 ; 上皮间质转化 ; 转移和侵袭
- 会议召开时间：2016-11-04
- 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会壁报交流集
- 英文会议录名称：Proceedings of 2016 CSI Congress on Immunology
- 语种：中文
- 分类号：R739.5
- 学会代码：IGMD
- 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
- 会议地点：中国安徽合肥
- 主办单位：中国免疫学会
- 学会名称：中国免疫学会
- 页数：1
- 文件大小：1200k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
研究背景:黑色素瘤因其恶性程度极高而成为皮肤恶性肿瘤致死的主要原因之一,高发的侵袭和转移是黑色素瘤最为显著的特征和影响患者生存的首要因素。Pim-3作为一种丝/苏氨酸蛋白激酶,主要通过磷酸化特异性底物、调控细胞周期和细胞凋亡,参与调控肿瘤的发生发展。但其调节肿瘤侵袭转移的作用和机制尚不清楚。目的 :我们构建了靶向Pim-3的双功能sh RNA表达载体,该载体既能沉默原癌基因Pim-3的表达、促进肿瘤的凋亡,又能通过活化TLR7受体激发机体抗肿瘤免疫应答。本研究旨在通过此双功能sh RNA表达载体介导的Pim-3沉默观察pim-3与黑色素瘤侵袭转移的关系,并进一步探讨其可能的分子机制。方法:用脂质体将p SIREN、ss RNA、Pim-3-sh RNA、ss RNA-Pim-3-sh RNA质粒转染到B16黑色素瘤细胞中,尾静脉注射建立B16肺转移模型,观察各个表达载体对肿瘤细胞肺转移的影响。并通过体外实验,用transwell实验检测其对B16转移侵袭的影响,荧光定量PCR和Western blotting技术检测EMT相关指标的变化,Western blot技术检测沉默Pim-3后STAT3的活化情况和免疫共沉淀技术(Co-IP)检测Pim-3与STAT3之间是否有结合,以探讨Pim-3调控侵袭转移的机制。结果 :Pim-3-sh RNA,尤其是ss RNA-Pim-3-sh RNA表达质粒能明显的抑制黑色素瘤的肺转移;sh RNA和ss RNA-Pim-3-sh RNA表达质粒能明显抑制EMT相关指标中上皮指标表达,诱导间质指标表达,最终抑制B16细胞的侵袭转移;沉默pim-3能诱导STAT3磷酸化水平的下降,且Co-IP结果显示pim-3和STAT3之间有明显的结合;IL-6活化STAT3能够逆转靶向pim-3表达载体所引起的肿瘤侵袭转移及EMT的变化。结论 :Pim-3能够通过增强STAT3的磷酸化而发挥促进黑色素瘤细胞的侵袭转移,靶向沉默pim-3能明显抑制黑色素瘤的肺转移。本研究为Pim-3作为抑制肿瘤侵袭转移的治疗靶点提供了依据。
引文