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Pam3CSK4通过激活树突状细胞增强机体对MRSA获得性免疫应答研究
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摘要
目的探讨Pam3CSK4预处理后的树突状细胞(DC)对热灭活的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的(MRSA)摄取递呈能力的影响。方法 1.利用rmIL-4和rmGM-CSF诱导产生小鼠骨髓源性DC,用Pam3CSK4(1ug/ml)预处理DC细胞,分别于24h、48h后再次给予FITC标记的热灭活MRSA刺激2h,流式检测DC捕获MRSA的能力;2.将已捕获MRSA的DC与正常小鼠T淋巴细胞混合培养,流式法检测T细胞表面CD69分子的表达;3.将上述已捕获MRSA的DC与MRSA免疫后的小鼠T细胞共培养,CFSE标记法观察Pam3CSK4预处理DC对T再次接触MRSA的应答。结果 1.生理盐水预处理组吞噬率为25.2%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的吞噬率分别为50.1%,57.6%,统计结果显示Pam3CSK4预处理DC对MRSA的摄取能力显著高于生理盐水组(P_(24h)=0.0094,P_(48h)=0.0020);2.混合淋巴培养结果显示,生理盐水预处理组T细胞CD69阳性率为3.47%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的T细胞CD69阳性率分别为9.38%,7.00%,统计结果表明Pam3CSK4预处理的DC能显著激发初始T细胞表面CD69分子的表达(P_(24h)=0.0193,P_(48h)=0.0422);3.CFSE标记法检测T细胞增殖试验结果显示,生理盐水对照组CD4阳性T细胞增殖率为9.97%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的CD4阳性T细胞增殖率为15.3%,13.4%,统计结果表明Pam3CSK4预处理24h能显著增强MRSA再次刺激T细胞的增殖(P=0.0376),而Pam3CSK4预处理48h与对照组相比无显著性差异(P=0.0762)。结论 Pam3CSK4预处理可显著增强DC细胞对MRSA的摄取能力,增强对初始T淋巴细胞的活化,并促进MRSA免疫后T细胞增殖,上述结果提示Pam3CSK4预处理可增强DC细胞的功能,从而影响机体对MRSA的获得性免疫。
引文

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