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Lkb1对肌肉和脂肪干细胞分化聚酯的影响及机理研究
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摘要
糖脂代谢影响着动物肌肉发育和脂肪(肌内脂肪)沉积,进而影响着畜产品的产量和品质。糖脂代谢关键因子Lkb1,又叫STK11,是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在动物能量代谢过程中发挥重要功能。但目前,关于Lkb1对动物肌肉和脂肪干细胞功能等方面的研究鲜见报道。本研究旨在探讨Lkb1对肌肉和脂肪干细胞分化聚酯的影响及其机理。建立小鼠肌肉和脂肪干细胞体外培养模型,利用基因敲除、基因超表达、免疫荧光、免疫共沉淀、荧光素酶检测等技术研究Lkb1对肌肉/脂肪干细胞分化聚酯的影响及调控机理。结果表明:1)在肌肉干细胞中,敲除Lkb1后显著上调Pax7、MyoD及脂质相关基因(Fabp4、Adipoq等)的表达,下调MyoG的表达,促进肌卫星细胞增殖,提高脂滴沉积,抑制成肌分化(P<0.05);成脂诱导后,Lkb1敲除的肌卫星细胞分化成"adipocyte-like"细胞,显著提高脂滴沉积和Fabp4、Adipoq等基因表达,降低MyoG、Myh3、Myh8等肌细胞分化标志基因的表达(P<0.05);其机理是通过AMPK信号通路影响肌卫星细胞增殖和脂滴沉积。2)在脂肪干细胞中,Lkb1敲除显著促进棕色脂肪(BAT)干细胞分化及BAT标志基因UCP1等的表达(P<0.05);同时,Lkb1敲除显著提高皮下脂肪(sWAT)干细胞分化聚酯和UCP1等BAT标志基因的表达(P<0.05),诱导"Browning";其机理是Lkb1敲除促进CRTC3进核,进核后CRTC3与C/EBPβ互作并调控C/EBPβ转录活性,促进UCP1基因表达。上述研究结果提示,Lkb1在调控肌肉/脂肪干细胞增殖和分化聚酯中发挥重要功能。本研究为通过Lkb1及其下游信号通路调控动物肌肉和脂肪发育及脂质代谢奠定了一定的理论基础。
引文

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