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一株萎缩芽胞杆菌Bacillus atrophaeusYL3的鉴定及其脂肽类化合物分析
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摘要
萎缩芽胞杆菌(Bacillus atrophaeus)属芽胞杆菌,在含酪氨酸培养基上产生黑色素。萎缩芽胞杆菌能产生芽胞,耐受不良环境,无致病性,广泛应用于医疗卫生、工业和农业等领域。现已发现萎缩芽胞杆菌对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)等植物病原菌具有颉颃作用。实验室从江苏省徐州市贾汪区耿集镇草莓的根围土壤中,分离出对草莓枯萎病菌(F.oxysporum)具有较强颉颃作用的芽胞杆菌YL3。经过生理生化反应特征、16S rDNA及gyrB基因序列比对,鉴定为萎缩芽胞杆菌。采用室内平板对峙生长法测定其抑菌活性,发现菌株YL3对黄单胞菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)的抑制作用最强,抑菌圈直径为55.67mm,可形成明显的抑菌圈,其次对欧文氏菌(Erwinia amylovora)也具有较好的抑制作用,抑菌圈直径为36.50mm。菌株YL3对草莓枯萎病菌和甘蓝黑斑病菌菌丝生长有较强的抑制作用,抑制率分别为49.63%和51.30%,对草莓炭疽病菌和油菜菌核病菌菌丝生长的抑制作用相对较弱,抑制率分别为43.15%和45.74%。萎缩芽胞杆菌YL3水剂10倍稀释液处理后,对草莓枯萎病防效与对照药剂多菌灵800倍液(即田间推荐使用浓度)效果相当,100倍稀释液对"宁玉"品种和"红颊"品种的枯萎病防效分别为67.62%和59.26%,而化学药剂50%多菌灵1 600倍稀释液的防效较差,分别为29.52%和34.89%。采用酸沉淀法提取菌株YL3脂肽类化合物并进行高效液相色谱串联质谱分析(LC-MS)。结果表明,菌株YL3发酵液中脂肽类粗提物对草莓枯萎病菌菌丝生长有抑制作用,随着剂量加大抑制效果显著。LC-MS检测到菌株YL3脂肽类粗提物中含有表面活性素和泛革素的离子峰出现,由此推断菌株YL3室内抑菌作用可能是产生了对细菌有强烈颉颃作用的表面活性素和对病原真菌有强烈颉颃作用的泛革素。
引文

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