牛奶中磺胺类药物残留不同检测方法的比较

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• 论文作者：马明芳 ; 李成龙 ; 张素霞 ; 王战辉
• 年：2016
• 作者机构：北京市食品营养与人类健康高精尖研究中心中国农业大学动物医学院;
• 论文关键词：酶联免疫检测(ELISA) ; 荧光偏振检测(FPIA) ; 化学发光共振能量转移(CRET) ; 磺胺药
• 会议召开时间：2016-05-25
• 会议录名称：第七届中国畜牧科技论坛论文集
• 英文会议录名称：Proceeding of the 7th China Animal Husbandry Sci-tech Forum
• 语种：中文
• 分类号：S859.84
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：第七届中国畜牧科技论坛
• 会议地点：中国重庆
• 主办单位：中国畜牧兽医学会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：2
• 文件大小：102k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

(目的)建立快速、高效、灵敏的免疫分析方法,检测牛奶中磺胺类药物残留。(方法)本实验比较了3种不同的免疫检测方法,酶联免疫检测(ELISA)、荧光偏振检测(FPIA)和化学发光共振能量转移(CRET)检测方法。ELISA体系,将磺胺半抗原BS与BSA偶联,得到的BS-BSA作为包被原,采用间接竞争方法进行检测;FPIA体系中采用荧光素4'-AMF标记磺胺半抗原BS,得到4'-AMF-BS,4'-AMF-BS与磺胺标准品(SMZ)竞争结合磺胺单克隆抗体4D11建立均相体系,检测体系偏振值的信号变化;CRET体系,将磺胺单克隆抗体4D_(11)透析纯化,使用过碘酸钠法将其与辣根过氧化物酶(HRP)偶联,得到酶标抗体Ab4D_(11)-HRP。利用碳二亚胺法(EDC)将磺胺药物半抗原BS与表面带有氨基基团的水溶性量子点(NH_2-QDs)进行共价偶联,得到QDs-BS,QDs-BS与磺胺药物标准品(SMZ)竞争Ab4D_(11)-HRP,加入底物鲁米诺,检测该均相体系中量子点荧光信号值变化。3种检测方法体系均选择磷酸盐缓冲溶液(PBS)作为稀释液。将牛奶样本用等体积1.5%的三氯乙酸处理,沉淀蛋白,上清液使用PBS分别进行2倍(ELISA)、4倍(FPIA)和20倍(CRET)稀释可基本消除基质效应。(结果)三种检测方法ELISA、FPIA、CRET对磺胺二甲基嘧啶(SMZ)的检测限分别为:12.1μg/L、0.151μg/L、0.009μg/L;3种方法的回收率均在64.7%~125.3%,变异系数均小于16.3%。(结论)本研究比较了3种不同的免疫检测方法,所建立的方法灵敏度和检测限均满足我国牛奶中对磺胺药物的残留检测要求。而且,基于量子点的CRET检测方法灵敏度高于FPIA和ELISA,而且CRET均相反应体系比ELISA方法更省时简便,性质更加优越。

引文