人偏肺病毒亚克隆的建立与鉴定
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- 论文作者：刘爱玲 ; 王琼 ; 林首任 ; 陆学东
- 年：2011
- 作者机构：深圳市第四人民医院检验医学部;
- 会议召开时间：2011-09-27
- 会议录名称：第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛论文汇编
- 语种：中文
- 分类号：R440
- 学会代码：WSWZ
- 会议名称：第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛
- 会议地点：中国浙江宁波
- 主办单位：中国微生物学会临床微生物学专业委员会
- 学会名称：中国微生物学会临床微生物学专业委员会
- 页数：1
- 文件大小：49k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
目的:构建人偏肺病毒基因组亚克隆,为下一步全基因克隆及更全面深入地了解人偏肺病毒奠定基础。方法:根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物,运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段,切割含目的条带的凝胶进行纯化,并将目的片段连接到PJET1.2/blunt克隆载体,转化感受态细胞TOP10,经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选,得到阳性克隆,提取质粒,最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定。结果:所获的阳性条带经PCR和测序鉴定证实为hMPV部分片段。结论:成功构建了hMPV基因组亚克隆,可进一步用于全基因克隆。
引文