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一种新的白塞氏病相关自身抗原β微管蛋白
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摘要
白塞氏病(Behcet’s disease,BD)是一种以细小血管炎为主要病理表现的多系统性自身免疫疾病,其发病过程中伴随着大量自身抗体的产生。自身抗体在BD发病中发挥关键作用,鉴定这些抗体相应的自身抗原不仅有利于疾病的早期诊断,也有利于深入理解疾病的发病机制。目前发现的BD相关血清标志物多与内皮细胞抗体相关,如由国外学者首先发现的抗异质性细胞核核糖蛋白抗体和抗α-烯醇化酶抗体,以及近期我们课题组在中国汉族白塞氏病患者体内率先发现的抗热休克蛋白27抗体和抗膜联蛋白A2抗体,但相对其他自身免疫性疾病,我国涉及BD的基础研究仍然非常匮乏。进一步开展从内皮细胞中筛选关键的BD相关自身抗原,仍然是未来一段时间白塞氏病基础研究的一个重要方向。本研究旨在从人脐静脉内皮细胞中筛选白塞氏病相关自身抗原。应用Western blot技术从脐静脉内皮细胞全蛋白中筛选BD患者血清中相关自身抗体,并用质谱鉴定Western blot结果中的阳性蛋白条带。然后对这些自身抗体所对应的结合蛋白进行分子克隆、载体构建、表达纯化,并用Western blot和免疫共沉淀方法在临床样本中进行验证。本研究从人脐静脉内皮细胞中成功筛选到一个分子量约55 k Da的蛋白条带,经质谱鉴定为β微管蛋白,免疫印迹和免疫共沉淀实验结果进一步验证β微管蛋白和BD血清能发生特异性结合。但是在免疫共沉淀实验中,我们发现β微管蛋白和健康人血清也可以发生结合。内皮细胞蛋白β微管蛋白是白塞氏病的一个相关自身抗原,可能对该病的早期检测及动态监测具有重要意义。但是免疫共沉淀结果表明该蛋白抗体在健康人血清中也有一定比率存在,白塞氏病人血清和健康人血清中β微管蛋白抗体水平是否存在医学上的实用价值还需要进一步的临床验证。另外,病人的动态监测和随访监测对β微管蛋白的抗原性研究也至关重要。
引文

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