三种马铃薯Y病毒属病毒通用型单克隆抗体的鉴定
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- 论文作者：王永志 ; 李小宇 ; 张春雨 ; 李启云 ; 宋景荣 ; 尤晴 ; 张淋淋
- 年：2016
- 作者机构：吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室吉林省农业微生物重点实验室;呼伦贝尔市农业科学研究所;
- 论文关键词：马铃薯Y病毒 ; 大豆花叶病毒 ; 三叶草黄脉病毒 ; CP蛋白 ; 抗体鉴定
- 会议召开时间：2016-08-05
- 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
- 语种：中文
- 分类号：S432.41
- 学会代码：ZGVS
- 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
- 会议地点：中国江苏南京
- 主办单位：中国植物病理学会
- 学会名称：中国植物病理学会
- 页数：1
- 文件大小：44k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
鉴定和分析马铃薯Y病毒属的三种病毒病,即大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、三叶草黄脉病毒(Clover yellow veinvirus,CLYVV)的通用型单克隆抗体。提取PVY感染的马铃薯叶片和SMV感染的大豆叶片总RNA,RT-PCR克隆PVY和SMV的Coat protein(CP)基因,利用已有的CLYVV CP基因,构建原核表达载体pET28-PVY CP、pET28-SMV CP和pET28-CLYVV CP。诱导、表达和纯化PYV、SMV和CLYVV的CP蛋白。采用ELISA方法,用9株实验室制备的单克隆抗体对PVY、SMV、CLYVV的病毒悬液和表达并纯化的重组CP蛋白进行检测分析。成功表达并纯化了PYV、SMV和CLYVV CP蛋白。ELISA检测表明,9株单克隆抗体均识别SMV病毒,2D3、4F9、4G12和6E7 4株单克隆抗体能够识别PVY病毒,4F9和4G12能够识别CLYVV病毒,但PVY、CLYVV病毒与抗体的亲和力低于SMV病毒;对于重组表达的衣壳蛋白:SMV、CLYVV与2D3、4F9、4G12和6E7四株抗体反应强烈,PVY与4F9和4G12两株抗体反应稍强。综上,本研究鉴定出能识别PVY、SMV、CLYVV的通用单克隆抗体4F9和4G12,为马铃薯Y病毒病毒的检测研究提供了一种广谱性的抗体材料。
引文