石斑鱼c-Jun基因在虹彩病毒SGIV感染中的功能分析

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• 英文论文题名：Characterization of c-Jun from orange-spotted grouper,Epinephelus coioides involved in SGIV infection
• 论文作者：魏世娜 ; 黄晓红 ; 黄友华 ; 秦启伟
• 英文论文作者：WEI Shina ; HUANG Xiaohong ; HUANG Youhua ; QIN Qiwei ; Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology ; South China Sea Institute of Oceanology ; Chinese Academy of Sciences
• 年：2016
• 作者机构：中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室中国科学院南海海洋研究所;
• 论文关键词：石斑鱼 ; c-Jun基因 ; 虹彩病毒SGIV ; 功能分析
• 英文论文关键词：Epinephelus coioides ; c-Jun ; SGIV ; function analysis
• 会议召开时间：2016-11-02
• 会议录名称：2016年中国水产学会学术年会论文摘要集
• 语种：中文
• 分类号：S943
• 学会代码：OGSB
• 会议名称：2016年中国水产学会学术年会
• 会议地点：中国四川成都
• 主办单位：中国水产学会、四川省水产学会
• 学会名称：中国水产学会
• 页数：1
• 文件大小：563k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

c-jun蛋白在炎症反应和病毒感染中起了重要的作用。本研究通过RACE扩增得到石斑鱼c-Jun基因的cDNA全长。c-Jun基因在石斑鱼正常组织心脏、肾脏、头肾、脾脏、鳃、肠中表达相对较高,而在脑、皮肤、胃、肝、肌肉中相对较低。SGIV刺激细胞后,头肾组织中c-Jun基因表达量明显增加,推测c-Jun在SGIV感染中发挥了一定的作用。亚细胞定位结果表明,野生型Wt-c-Jun和显性负性突变体Dominant-negative(Dn-c-Jun)基因均主要分布于细胞核中,揭示该基因的磷酸化位点对于该基因亚细胞定位没有明显的影响。当在转染的细胞中感染SGIV后,大部分野生型Wt-c-Jun的绿色荧光从细胞核中转移到胞质中的病毒装配中心,这和我们以前报道的研究结果是一致的。而Dn-c-Jun的绿色荧光的定位没有发生明显的变化,仍然主要分布在细胞核,推测该基因的磷酸化位点对于该基因的功能是必需的(图)。与空载体对照组相比,过表达Dn-c-Jun基因不仅能明显延缓SGIV感染引起的细胞病理变化和降低病毒基因的转录,还能抑制c-Jun和AP1基因的启动子活性,推测野生型的Ec-Jun基因磷酸化有利于SGIV的复制。
In this study, the c-Jun gene(Ec-c-Jun) was cloned from orange-spotted grouper,Epinephelus coioides. Fluorescence microscopy observation revealed that Ec-c-Jun and DN-Ec-c-Jun were expressed predominantly in the nucleus in transfected cells. Interestingly, the green fluorescence of Ec-c-Jun was congregated and co-localized with virus assembly sites at the late stage of SGIV infection. However, in DN-Ec-c-Jun transfected cells, no virus assembly sites were observed, and the distribution of fluorescence remained unchanged. Moreover,overexpression of DN-Ec-c-Jun in vitro delayed the occurrence of CPE induced by SGIV infection and inhibited the virus gene transcription. In addition, ectopic expression of DN-Ec-c-Jun was able to inhibit SGIV induced c-Jun/AP1 promoter activity in GS cells. Thus, we proposed that c-Jun transcription factor was essential for SGIV replication in vitro. Our results will contribute to understanding the crucial roles of JNK signaling pathway in fish virus infection.

引文