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环介导等温扩增检测B群链球菌方法的建立及临床应用
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摘要
目的:建立采用环介导等温扩增(LAMP)技术从临床标本中快速检测B群链球菌的方法。方法:根据美国国家生物信息中心上提交的B群链球菌的cfb基因序列(登陆号X72754)设计特异LAMP引物,以热裂解法提取标本中细菌的DNA,然后以LAMP技术扩增cfb基因来鉴定其是否为B群链球菌。在采用LAMP技术检测B群链球菌的同时,以选择性培养法和PCR技术平行检测相同标本,并将三种方法的检测结果比较。结果:在各176例阴道拭子和直肠拭子中,选择性培养法检测到的B群链球菌例数为49和61、LAMP法检测到的B群链球菌例数为49和59,PCR法检测到的B群链球菌例数为48和58。以选择性培养法为金标准,LAMP法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为96.7%和100%,PCR法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为95.1%和100%。LAMP法检测B群链球菌的时间为2h左右,模拟标本的检测结果显示该方法的最低检测限为102CFU/ml。结论:该方法灵敏度高,特异性强,操作方便简单,适合从临床标本中快速检测B群链球菌。
引文

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