表达单一大肠杆菌耐热肠毒素A(STa)的重组大肠杆菌诱导仔猪腹泻模型的建立
详细信息 查看官网全文
摘要
大肠杆菌是导致仔猪腹泻的主要致病菌之一,耐热肠毒素A(STa)是其毒性最强的致病因子。为更好研究STa导致腹泻的机理,本试验尝试建立单一肠毒素STa作用下的仔猪腹泻模型。试验选取7日龄左右健康且大小匀称的杜×长×大三元杂交哺乳仔猪24头(未做大肠杆菌相关疾病免疫),按单因子设计随机分为4个组,每组设置6个重复,每个重复1头仔猪。4个处理组分别为空白对照组、大肠杆菌LMG194-pBAD-STa组(记为STa组)、大肠杆菌LMG194组(空菌对照组)和大肠杆菌K88组(阳性对照组,记为K88组)。试验中各组菌株的接种量为2×109CFU,观察仔猪的腹泻情况,测定腹泻相关的指标数据。试验结果表明:攻毒期间STa组及K88组腹泻率显著高于空白对照组及空菌对照组(P<0.05),而攻毒前各组腹泻率差异不显著;血常规指标显示:STa组、LMG194组及K88组嗜中性粒细胞比例(NEUR)相对空白对照组都显著降低(P<0.05),淋巴细胞比例(LYMR)相对空白对照组均显著升高(P<0.05);血液生化指标显示:STa组、LMG194组及K88组相对空白对照组谷丙转氨酶(ALT)都有显著降低(P<0.05),而STa组相对空白对照组谷草转氨酶(AST)有升高的趋势;肠道形态学指标结果显示:STa组、LMG194组及K88组均显著降低了十二指肠及回肠的绒毛高度(P<0.05),STa组及K88组显著降低了小肠各肠段的绒毛表面积(P<0.05)。攻毒前后相比较,STa组及K88组相比空白对照组,血浆中D-木糖含量显著降低(P<0.05),表明其肠道吸收功能受损。STa组及K88组相比空白对照组,血浆中二胺氧化酶(DAO)含量显著降低(P<0.05),表明小肠黏膜上皮细胞在接毒后受损严重。本研究结果提示,通过攻毒后的仔猪腹泻相关指标的测定可以初步确定大肠杆菌耐热肠毒素A(STa)诱导的仔猪腹泻模型建立成功。
引文