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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌尿路感染分离株对磷霉素耐药性及耐药机制研究
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摘要
目的分析磷霉素对产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌尿路感染分离株的抗菌活性及其耐药机制。方法收集2011年1月至2015年12月间从温州医科大学附属第一医院尿路感染患者尿液标本中分离的产ESBL大肠埃希菌356株,通过琼脂稀释法测定大肠埃希菌对磷霉素的最低抑菌浓度(MIC);PCR扩增磷霉素耐药基因(fosA、FosA3、fosB、fosB2、fosC、fosC2和fosX)和β-内酰胺酶耐药基因(bla_(SHV)、bla_(TEM)、bla_(CTX-M)),检测磷霉素靶酶(MurA)、磷霉素转运系统(GlpT和UhpT)以及转运系统调节基因(uhpA,pstI和cyaA)是否存在基因突变;接合转移试验探究磷霉素耐药基因的转移特性;Southern杂交对fosA3所在位置进行定位分析;多位点序列分型(MLST)分析菌株的流行特点。结果 7.5%(26/356)大肠埃希菌对磷霉素不敏感,非敏感菌株中fosA3基因携带率较高,占76.9%(20/26)。17株fosA3阳性菌接合转移成功,其中14株细菌fosA3基因与β-内酰胺酶基因bla_(CTX-M)同位于54.2kb大小的质粒上并共同转移。4株fosA3阴性非敏感菌株发生氨基酸替代。MIST结果显示26株非敏感菌株分属于多个不同的ST型。结论携带fosA3基因为本研究中大肠埃希菌磷霉素耐药的主要机制。fosA3基因可与bla_(CTX-Mβ-)内酰胺酶基因共同转移。本研究中磷霉素非敏感菌株间的同源性较低,未发生明显的克隆传播现象。
引文

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