摘要
【研究目的】菠萝叶纤维是新的天然植物纺织材料,具有良好的品质和独特的风格,市场前景广阔。菠萝叶纤维需要经过脱胶处理才能纺纱。纤维脱胶是多酶系参与的复杂过程,其中果胶裂解酶起到了重要作用。发掘新型果胶酶因发掘利用有助于推动菠萝叶纤维脱胶,推动产业良性发展。【方法】根据CAZy数据库Dickeyadadantii 3937果胶裂解酶基因信息设计引物,从菠萝叶纤维脱胶菌株Dickeyadadantii BTC105中克隆果胶裂解酶pelN基因,连接表达载体pet30a,转化E.coliB L21(3DE)进行诱导表达;【结果】克隆得到Dickeyadadantii BTC105果胶裂解酶pel N基因(Gen Bank登录号KX840321)全长1320bp,编码439个氨基酸,预测分子式为C2078H3155N591O642S11,为稳定蛋白,稳定系数为31.80;分泌蛋白,其中第1-25个氨基酸为信号肽区域;含有属于SSF51126超家族及Beta螺旋结构。该基因与该属模式菌株Dickeyadadantii3937 Pel N亲缘关系较近。经IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳分析该蛋白分子量约为46KD;【结论】本研究从菠萝叶纤维脱胶菌株中分离并成功表达pel N基因,其表达产物在菠萝叶纤维生物脱胶中有着重要的应用前景。克隆并表达果胶裂解酶基因,以期改进菠萝叶纤维脱胶工艺,为生物脱胶机理的阐述提供依据。
引文