产甲壳素酶菌株的发酵条件、酶的分离纯化及酶学性质研究

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• 出版年：2010
• 作者：韩宝芹；伊金玲；蔡文娣；杨艳；董文；刘万顺
• 单位1：中国海洋大学海洋生命学院
• 出生年：1963
• 职称：教授
• 语种：中文
• 作者关键词：甲壳素酶；发酵条件；分离纯化；酶学性质
• 起始页：57
• 总页数：7
• 刊名：中国海洋大学学报
• 是否内版：否
• 刊频：月刊
• 创刊时间：1959
• 主管单位：中华人民共和国教育部
• 主办单位：中国海洋大学
• 主编：管华诗
• 卷：40
• 期：10
• 期刊索取号：P226.066110-1
• 核心期刊：中国科学技术信息研究所核心期刊；中国科学院文献情报中心核心期刊；北京大学图书馆核心期刊

摘要

利用甲壳素为唯一碳源从土壤中筛选得到1株产甲壳素酶活力较高的菌株HD002，初步鉴定其为Massilia属。确定菌株产甲壳索酶的最适培养基组成为(g/L)∶(NH₄)₂SO₄ 5，K₂HPO₄ 0.7，KH₂ PO₄ 0.3，MgSO₄·7H₂O1，胶体甲壳素10；最适产酶培养条件为：培养基起始pH值6．0，培养时间192h，发酵液酶活力达1.314U/mL。采用70%饱和度硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose F．F阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析对该甲壳素酶进行纯化，SDS-PAGE证明达到电泳纯。该甲壳素酶的分子量为60.2kDa，最适反应温度为55℃，最适反应pH值为5．0，Cu²⁺和Fe³⁺对酶活力有明显的抑制作用，Ca²⁺和Na⁺对酶活力有明显的促进作用。